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关于ce-sds gel buffer, Beckman vs. Agilent和自制缓冲液

毛细管电泳(CE)

  • 不知道这里是不是很多人在ce-sds上跑单抗,在Beckman出来比225kD的都大,但是在Agilent上就正常的大小。想知道有人知道为什么吗?是因为gel buffer不一样吗?不知道换buffer是不是能解决这个问题。有人试过自己做gel buffer的吗,有什么推荐的recipe吗?

    是在ce sds上跑nr的单抗。
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  • cpudaxiao

    第1楼2013/06/29

    应该是不同品牌CE的内部管路设计不同,检测器性能差异造成的。

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  • zz2003

    第2楼2013/06/29

    谢谢回答。也就是说不是缓冲液设计的原因吗?那有没有什么方式可以在beckman上跑出大小正确的峰呢?谢谢!

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:应该是不同品牌CE的内部管路设计不同,检测器性能差异造成的。

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  • zz2003

    第3楼2013/06/29

    是在ce sds上跑nr的单抗。

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  • cpudaxiao

    第4楼2013/07/01

    毛细管电泳和其它分析仪器不一样。缓冲液浓度与组成确实可以影响出峰大小。按原理来讲是缓冲液影响样品形态,如解离度,荷电系数等。因此,CE定量一定要加矫正因子,因为差异比较明显。

    大小正确的峰一般来讲的话,主峰不要过大,导致杂质峰淹没或是无法积分为度。一般是先用标准品稀释一个梯度浓度,分别上样,看合适的峰大小对应什么浓度,也就是做一个五点定量标准曲线,然后估算。

    zz2003(zz2003) 发表:谢谢回答。也就是说不是缓冲液设计的原因吗?那有没有什么方式可以在beckman上跑出大小正确的峰呢?谢谢!

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  • nini2006

    第5楼2013/07/01

    这里有个帖子,可能会对你有帮助:

    单抗CE-SDS分析结果解读
    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20121218/4442994/

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