油脂样品中苯并(a)芘测定Cleanert BAP-3固相萃取-反相高效液相色谱法【连载】

三、实验步骤

3.1试样处理

（1）使用正己烷配制200ppm苯并（a）芘标准品标样备用，并用正己烷稀释成1ppm苯并（a）芘工作液备用。

（2）取0.5g油于12mL样品瓶（P/N：1509-1800和P/N：1515-1748）中，加3mL正己烷涡旋震荡溶解，作为待净化液，若要做加标实验，根据需要向油中先加入适量的标准品。

3.2固相萃取方法

固相萃取柱名称：Cleanert BAP-3 (P/N：Bap5006)；

（1）针对花生油、大豆油、玉米油、葵花籽油、稻米油、胡麻油、调和油、菜籽油、橄榄油，固相萃取方法如下：

Ø 活化：5ml二氯甲烷，5mL正己烷；

Ø 上样：将3.1中的待净化液上样到Cleanert BAP-3柱上，然后再用2mL正己烷润洗样品瓶，然后也上样到柱上；

Ø 淋洗：10ml正己烷；

Ø 洗脱：5ml二氯甲烷，收集于20mL玻璃瓶（P/N：AV7100-7和P/N：AV7920-0）中；

Ø 浓缩：将样液在40℃下氮气吹干，用1mL乙腈定容，超声10s，过PTFE 0.22um滤头，收集于1.5mL样品瓶（P/N：1109-0519和P/N：AV2100-0）的内插管（P/N：0609-0357）中，待测；

另取1mL加标浓度的标样（正己烷溶）40℃吹干1mL乙腈定容，作为液相检测时用的参考标样。

（2）针对香油，需要在Cleanert BAP-3柱上串联一只Cleanert Si硅胶固相萃取柱（500mg/6mL，P/N：Si5006），按照（1）中的方法进行活化、上样，注意淋洗时先用5mL正己烷淋洗串联柱，然后弃去硅胶柱，再用5mL的正己烷二次淋洗Cleanert BAP-3柱，最后按照（1）中的方法对Cleanert BAP-3柱进行洗脱和浓缩。

3.3液相色谱法检测条件

色谱条件：

色谱柱：Venusil ASB-C18，4.6mm×250mm×5.0µm（P/N：VS952505-0）；

流动相：乙腈：水 88%：12%；

流速：1.0mL/min；

进样量：20µL；

柱温：30℃；

荧光检测器：发射波长406nm，激发波长384nm。

四、方法学考察

4.1 标准曲线绘制

将标准工作液稀释到浓度分别为：0.5，1.0，2.0，5，10.0µg/L，根据峰面积建立标准曲线。根据实际油样中苯并（a）芘的可能含量，可以将标准曲线的线性范围延伸到50µg/L。

4.2 样品分析

将3.1的样品进样分析，采用外标法定量。

苯并（a）芘含量按下式计算：

其中：

w为样品中苯并（a）芘含量，单位为µg/Kg；

c为从标准曲线得到的待测液中苯并（a）芘的浓度，单位为µg/L；

V为最终定容体积，单位为µL；

m为称取的油样品质量，单位为g；

五、测试结果

5.1液相色谱法测试结果

六、实验结论

Cleanert BAP-3 去除油脂中杂质的效果良好，前处理的操作过程简单快捷。在1、5和10μg/L三个不同浓度的苯并芘的添加回收率大于80%。

七、所用耗材列表

看起来，Cleanert BAP-3 去除油脂中杂质的效果还真不错

应助达人

为何不发在一个帖子里，看时容易些。

正己烷的毒性蛮大的，操作时要做好防护。