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这里列举了几种氨基酸的分析方法,各位主要用哪种呢?

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  • 最近看了一些文献,发现做氨基酸的方法非常多,这里罗列几种,不知道各位主要用哪种?

    由于大多数的氨基酸在紫外区没有吸收或只有微弱的吸收,为提高检测灵敏度和分离度,需要对氨基酸进行衍生化,这样才能被紫外或荧光检测器所检测。

    另外氨基酸极性非常大,无法用反相分析,通过衍生化也可以变离子型化合物为非离子型,用反相方法分离。

    1、 HPLC 柱前衍生

    柱前衍生:邻苯二甲醛(OPA)衍生一级氨基酸、9-氯甲酸芴甲酯(FMOC)衍生二级氨基酸

    色谱柱:AAA专用柱

    检测器:DAD338nm OPA-氨基酸;262nm FMOC-氨基酸)



    2、 HPLC柱前衍生

    柱前衍生:异硫氰酸苯酯(PITC

    色谱柱:AAA专用柱

    检测器:UV 254nm



    3、 HPLC柱前衍生

    柱前衍生:2,4-二硝基氟苯(DNFB

    色谱柱:AAA专用柱

    检测器:UV 360nm



    4、 HPLC柱前衍生

    柱前衍生: 6氨基喹啉基N羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯(AQC

    色谱柱:反相柱(C18

    检测器:UV 248 nm



    5、 HPLC 柱后衍生

    柱后衍生:邻苯二甲醛(OPA)

    色谱柱:AAA专用柱

    检测器:荧光或紫外



    6、 离子色谱法:

    HPAEC-IPAD(高效阴离子交换分离-积分脉冲安培检测)



    7、氨基酸分析仪

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  • dahua1981

    第1楼2013/11/01

    应助达人

    我一般都是柱前衍生

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  • 千层峰

    第2楼2013/11/01

    现在不是有种氨基酸分析仪吗?

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  • zy178

    第3楼2013/11/01

    您用的哪种衍生剂?

    dahua1981(dahua1981) 发表:我一般都是柱前衍生

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  • zy178

    第4楼2013/11/01

    有的实验室氨基酸项目做的少,没有必要配置氨基酸分析仪,多用HPLC的方法去做

    千层峰(jxyan) 发表:现在不是有种氨基酸分析仪吗?

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  • 千层峰

    第5楼2013/11/01

    氨基酸没分析过,之前用氨基酸合成多肽,也是用HPLC分析的。

    zy178(zy178) 发表:有的实验室氨基酸项目做的少,没有必要配置氨基酸分析仪,多用HPLC的方法去做

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  • ECHO007

    第6楼2013/11/01

    柱前衍生法占大多数。

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  • e-lab

    第7楼2013/11/01

    氨基酸手性分析要用什么手性柱分析比较好?

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  • zy178

    第8楼2013/11/01

    regis有款手性柱 ChiroSil RCA(+) or SCA(-),是专门用来分离氨基酸手性化合物的

    e-lab(e-lab) 发表:氨基酸手性分析要用什么手性柱分析比较好?

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  • zy178

    第9楼2013/11/05

    多肽HPLC相对简单些,用C18、C8、C4这些反相柱比较多。

    千层峰(jxyan) 发表:氨基酸没分析过,之前用氨基酸合成多肽,也是用HPLC分析的。

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