【9月原创】百花齐放斗艳，Welchrom® C18与ZORBAX对比

东风恶

2014/09/30

私聊

厂商论坛

百花齐放斗艳，Welchrom® C18与ZORBAX对比

目前，国家审评中心对申报品种的有关物质要求更严格，现在好多人都挂了，有些是挂了彩，有些是全挂了。。。国庆期间不说这个，权当瞎扯。

当前形势逼人，有关物质一定要认真研究，特别是和标准图谱对比，原研对比以及标准对比。下面以实例分享，标题就不列出药物名称啦。

色谱柱信息：welchrom c18 pn：00310-02041，sn：w132111841 4.6*150mm

实例分享：

1.阿莫西林克拉维酸钾

色谱条件：

有关物质 取本品的内容物适量，精密称定，加流动相A溶解（必要时冰浴超声助溶）并稀释制成每1ml中含阿莫西林2mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取适量，用流动相A定量稀释制成每1ml中含阿莫西林40μg的溶液，作为对照溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录Ⅴ D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶（A型）为填充剂；流动相A为0.01mol／L磷酸二氢钾溶液（用2mol／L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0），流动相B为0.01mol／L磷酸二氢钾溶液（用2mol／L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0）-乙腈（20:80），流速为每分钟1ml；检测波长为230nm；先以流动相A-流动相B（98:2）等度洗脱，待阿莫西林峰洗脱完毕后立即按下表进行线性梯度洗脱，t_R为阿莫西林主峰的保留时间，约为10分钟。取阿莫西林克拉维酸系统适用性试验对照品，加流动相A溶解并稀释制成每1ml中约含2.5mg的溶液，取20μl注入液相色谱仪，记录的色谱图应与标准图谱一致。取对照溶液20μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使阿莫西林峰的峰高约为满量程的25％；再精密量取供试品溶液与对照溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液两个主峰面积和的1.25倍（2.5％），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液两个主峰面积和的3.5倍（7.0％），供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液两个主峰面积和0.05倍的峰可忽略不计。

时间（分钟）
流动相A（%）
流动相B（%）
t_R + 0
98
2
t_R + 20
70
30
t_R + 22
98
2
t_R + 32
98
2

图谱对比：

Welchrom® C18

安捷伦：

结论：上图可以看出月旭色谱柱峰形较为尖锐，相对较好。

实例2.

盐酸度洛西汀有关物质：

色谱条件：采用美国药典的方法，初步翻译了下确定色谱条件如下：

取本品适量（约相当于度洛西汀45mg），置100ml量瓶中，加溶剂[缓冲液B（称取0.2g磷酸二氢铵和4.5g磷酸二氢钾，置1000ml量瓶中，加水适量使溶解并稀释至刻度，用磷酸调节pH值至8.0）-甲醇（50：:5）]适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；取供试液水浴加热1h，作为分离度试验溶液；另取度洛西汀杂质F和度洛西汀杂质H适量，加溶剂适量使溶解并稀释制成0.5μg/ml的溶液，作为系统适用性试验溶液。照高效液相色谱法（中国药典2010年版二部附录Ⅴ D）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为甲醇-四氢呋喃-缓冲液A（称取3.4g磷酸二氢钾加水适量使溶解并稀释至刻度，加入15ml三乙胺，用磷酸调节pH值至5.5）（32.3:9:58.7）；流速1.0ml/min；柱温45℃，检测波长230nm。取对照溶液、分离度试验溶液和系统适用性试验溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使度洛西汀的峰高约为记录仪器量程的20%，分离度试验溶液色谱图中各杂质峰之间分离度应符合要求，系统适用性试验溶液色谱图中度洛西汀杂质F峰与度洛西汀主峰分离应符合要求；精密量取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图至度洛西汀主峰保留时间4倍。

但是USP采用的是安捷伦的色谱柱（C8），信息如下：

色谱柱信息：welchrom c18 pn：00310-02041，sn：w132111841 4.6*150mm

够清楚了哈？

因为没有安捷伦的色谱柱，无图比较，从USP35也可以得到些信息：

大体情况如上，月旭色谱柱典型色谱图如下：

F杂质：

H杂质：

高温破坏杂质：

酸破坏：

酸破坏对比：连续3针峰重现性较好，说明仪器和色谱柱性能较为稳定。

清晰对比：

结论：安捷伦色谱柱暂时还未获得其色谱图，从月旭的C18色谱柱来看完全可以取代。