如何才能更好地保护色谱柱，延长色谱柱寿命？经验之谈

happytiankong1

2015/03/23

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在与用户接触过程中，发现很多时候色谱柱的寿命，往往是操作不当或不正确使用导致的。一般情况下，迪马的色谱柱，正常操作+前处理，色谱柱的寿命还是很长滴～～，下面安给大家总结一下，如何才能更好地保护色谱柱，延长色谱柱寿命？（以反相柱为例）

1.柱子的PH值使用范围
　　反相柱大部分是以硅胶为基质的填料，使用时一定要注意流动相的PH范围。一般的C18柱PH值范围都在2-8，流动相的PH值小于2时，会导致键合相的水解;当PH值大于7时硅胶易溶解;经常使用缓冲液固定相要降解。
一旦发生上述情况，色谱柱人口处会塌陷。同样填料各种不同牌号的色谱柱不尽相同。如果流动相PH较高或经常使用缓冲液时，建议选择PH范围大的柱子，例如迪马公司的Inspire色谱柱PH1-11或Diamonsil Plus色谱柱的PH 1.5-10。

2、样品的前处理
a、最好使用流动相溶解样品。
b、使用预处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。例如：迪马的FitMax针头式过滤器，目前团购活动中，每一个1元多一点。还是很实惠滴～～
3、流动相的配制：
a、流动相对样品具有一定的溶解能力，保证样品组分不会沉淀在柱中（或长时间保留在柱中）。
b、含水流动相最好在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要过夜。最好加入叠氮化钠，防止细菌生长。（这一点很重要，最好是随用随配，可以有效防止细菌生长，经常我们遇到客户色谱柱堵塞的原因就出在这里）
c、使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高柱性能。（为了保护色谱柱最好能用HPLC级的流动相，如果是进口的更好，这样在杂质方面控制较好。比如：迪马的DikmaPure溶剂，原瓶原装进口，品质保证）
4. 色谱柱的平衡：
　　反相色谱柱由工厂测试后是保存在乙腈/水中的。新柱应先使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈冲洗色谱柱。请一定确保您分析样品所使用的流动相和乙腈/水互溶。每天用足够的时间以流动相来平衡色谱柱，您就会在处理问题方面获得最大的"补偿"，而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!
操作步骤：

a.平衡开始时将流速缓慢地提高，用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂流速如果较低，则需要较长的时间来平衡）
b. 如果使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"即每天分析开始前必须先用纯水冲洗30分钟以上再用缓冲盐流动相平衡;分析结束后必须先用纯水冲洗30分钟以上除去缓冲盐之后再用甲醇冲洗30分钟保护柱子。