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做荧光实验时新发现!清高手指教.

分子荧光光谱

  • 在386nm附近和436nm附近有峰值,不知道原因.用的样品是湖泊里的水.
    另外一幅在313nm,336nm也不知道原因.请大家讨论以下.
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  • 夕阳

    第1楼2006/10/21

    应助达人

    (1)激发波长是多少?
    (2)两次测定图谱是一个样品吗?
    (3)使用的是什么型号的仪器?
    有可能将测试条件传上来看看

    galan 发表:在386nm附近和436nm附近有峰值,不知道原因.用的样品是湖泊里的水.
    另外一幅在313nm,336nm也不知道原因.请大家讨论以下.

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  • galan

    第2楼2006/10/23

    激发波长是激光532,仪器是SBP300光谱仪,光电传感器是PMT.

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  • galan

    第3楼2006/10/23

    多次测量的也是同样的样品.

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  • 夕阳

    第4楼2006/10/24

    应助达人

    (1)为何选择532nm的激发波长?
    (2)根据“斯托克定律”一般发射峰的波长要大于激发波长,因此即使你激发波长选择为532nm的话,发射波长也要从540nm开始向长波长方向扫描,怎会在低于532nm波长区域出峰呢?
    (3)在荧光应用中绝大多数的发射峰波长应该大于激发波长,这称为“上转换”;发射波长低于激发波长的应用也有,称为“下转换”,不过此种测试方法较为罕见,需要特殊的要求和条件;根据你的帖子来看,分析水没必要使用“下转换”方式
    (4)纯净水根本不存在荧光物质,只有拉曼峰;即使是湖泊的水如果较为纯净或杂质较少的话,基本测不出什么荧光信号
    (5)如果你执意要测湖水的荧光物质,建议你首先将激发波长设定为350nm,发射波长从360nm开始扫描到700nm看看;不过如果在397nm附近出峰的话,这个峰是水的拉曼峰,千万不要错认为是荧光峰;
    (6)不是任何物质都可产生荧光的,希望你参考一下【荧光分析手册】这本书,那里面有详细的荧光理论介绍
    (7)不知你从事何种分析领域,也不知你要分析何种物质,只能乱猜测的发表一些不成熟的见解,仅供你参考吧!

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  • nitrite1

    第5楼2006/10/24

    反斯托克定律的情况是比较少的

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  • galan

    第6楼2006/10/24

    你说的确实很有道理,理论上很正确,我也知道,但是我实际做起来却出现了新的现象,特别是在别532小的波长范围内出现的峰值不明原因,可能是反斯托克斯光谱,但是即使我用的是自来水,在低于532的范围内也有峰值,,荧光是不可能的,可不可能是拉曼光谱,但是在655是水的斯托克斯光谱,与532对称的地方应该是反斯托克斯光谱,那也应该在410左右.
    我做的是湖泊水体的散射光谱分析,希望给予指导!!!!

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  • galan

    第7楼2006/10/24

    我们实验室只有这个激光器比较好用,用这个激光器应该不会有什么问题吧.

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  • dali2006

    第8楼2006/10/25

    [quote]原文由 anping 发表:(3)在荧光应用中绝大多数的发射峰波长应该大于激发波长,这称为“上转换”;发射波长低于激发波长的应用也有,称为“下转换”,不过此种测试方法较为罕见,需要特殊的要求和条件;
       有个概念提出来:
    上转换发光是一种反斯克托克斯发光,是指发射光子的能量大于激发光子的能量。即发射波长低于激发波长。这样,在荧光应用中绝大多数的发射峰波长应该大于激发波长,应称为“下转换”。

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  • 夕阳

    第9楼2006/10/25

    应助达人

    8楼的朋友更正得很正确。
    反“斯托克斯”荧光称为“上转换”荧光,一般稀土元素可出现发射的荧光波长短于激发波长的上转换现象。
    发射波长比激发光波长更长的荧光一般称为“斯托克斯”荧光。
    与激发光具有相同波长的荧光称为“共振荧光”。

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  • galan

    第10楼2006/10/26

    但是出现我这种实验现象的原因,我就不是很明白了.请高手指点...

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