[我爱学习]Amdis解卷积软件初步应用（13）----难分离共流峰处理实例2

（13）----难分离共流峰处理实例2

1、例子的初步分析
在前面（Amdis解卷积软件初步应用（12）----难分离共流峰处理实例的例子1）中的例子，虽然两种化合物几乎合在一起，但一个是醇（香叶醇），一个是酸（己酸），两者的主要离子差别大，比较明显。下面看看另外一个例子，是在非极性柱子-5MS上面橙花醇（Nerol）和香茅醇(Citronellol)两个化合物也是几乎完全重合在一起，且大的主要离子一样。

这张图的16.787min峰，表面上也是一个单个峰，点击峰顶。

工作站检索后无法得到好的匹配和结果：

在峰的两侧不同区域试着检索。在左侧点16.757min：

检索为Nerol, 但最高匹配度仅为72，这是因为峰的纯度不高，夹杂别的成分而影响检索的匹配度。

在右侧点16.809min：

检索为Citronellol, 最高匹配度也为72，这是因为峰的纯度不高，夹杂别的Nerol而影响检索的匹配度：

虽然两侧的匹配度都是72，但还是比较幸运的了，两个成分都看到了。但定量是比较难办了。

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2、选择和提取相关离子
下面对比Nerol和Citronellol的质谱图：

可以看出，两者共有的（比较大）离子为m/z41，55，69等。有差别离子（比较小）如下：
Nerol： m/z 82 93 111 121 136 154
Citronellol m/z84 95 109 123 138 156
进行提取m/z 41，69 ，93，95，121，123离子如下：

发现前面是Nerol，后面是Citronellol，但相互包裹，“爱”在一起，比较难以扣除对方来检索。

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3、纯度分析估计
再利用安捷伦工作站的峰纯度分析看看：

可以看到，和前面提取离子图的Nerol和Citronellol的离子轮廓差不多。
工作站纯度分析结果：
Peak 2
Ret time 16,79
Components 2
Scan ion ion
1 2896.2 93 39
2 2897.4 69 41
3 2898.3 81 82
可能有2个组分。

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4、初步定量
看看怎样定量合适？
观察前面的两者离子，看到Nerol的m/z 93和Citronellol的m/z 95的丰度差不多。提取这两个离子。

并手动积分，m/z 93离子的峰面积约为2449526，m/z为2336980，两者大致比例为1:1（1:0.954）。可以作为定量比例的参考。当然这个只是粗略的估算。如果要较为准确的计算，还需要用这两个离子或其它特征离子来做标准校正曲线来测定。

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5、Amdis解卷积定性定量
运行Amdis（注：Amdis参数：Resolution: Medium; Sensitivity：low; Shaperequirements: Medium。）：

从结果看有Nerol，Geraniol和Citronellol。有Geraniol的原因是因为Nerol和Geraniol互为异构体，且离子几乎一样，所以把Nerol认成为Geraniol。仔细观察，点击amdis结果的化合物名称Geraniol，发现第二个就是Nerol，在实际选择时候就应该选择Nerol，而不是Geraniol。当然利用保留指数判断就更容易选择正确的化合物了。
Amdis的大致定量为：
时间 名称 amount
16.7784min Nerol 0.547%
16.7826min Nerol 0.711%
16.7857min Nerol 0.808%
SUM 2.066%
16.7867 Citronellol 0.833%
16.7893 Citronellol 0.716%
16.7914 Citronellol 0.703%
SUM 2.252%
Nerol和Citronellol大致比例约为1:1.09。可以作为计算两者的比例的参考。
相对讲，利用amdis会更方便更容易一些来处理这类复杂共流峰。