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用溶剂冲洗色谱柱
kromasil爱湾
2017/09/29
私聊
厂商论坛
用溶剂清洗色谱柱包括将色谱柱从GC上卸下来,并将几毫升溶剂至于色谱柱中。任何可溶于清洗剂的残留物就会从色谱柱中去除。如果未卸下色谱柱就注入大量溶剂,将不能清洗色谱柱,也不能从色谱柱中去除任何污染物。毛细管GC色谱柱必须具有键合和交联的固定相才可以使用溶剂进行清洗。使用溶剂清洗非键合的固定相会严重损坏色谱柱。
可使用色谱柱清洗装置来将溶剂注入色谱柱中,溶剂冲洗装置会连接到有压力的气源(N2或He),并把色谱柱插入到清洗装置中。把溶剂加入样品瓶中,然后使用气源对溶剂瓶回压。压力会强制溶剂流过色谱柱。残留物将溶解到溶剂中,并随溶剂反冲出色谱柱。然后将溶剂吹扫出色谱柱,并对色谱柱进行适当的老化。
清洗色谱柱前,从色谱柱的前端将其切去半米(即靠近进样器的一端)。将色谱柱连接检测器的一端插入清洗装置中。通常使用多种溶剂来清洗色谱柱。后面继续使用的溶剂必须与前面的溶剂互溶。一定不要使用高沸点溶剂,特别是不要用作最后使用的溶剂。溶解样品的溶剂通常是不错的选择。
建议使用甲醇、二氯甲烷和已烷,它们在大多数情况下都不错。可使用丙酮替代二氯甲烷、以避免使用含氯溶剂,但是二氯甲烷是最好的清洗溶剂之一。如果注射的是水性样品(例如生理体液或组织),则请在使用甲以前先使用水来冲洗。某些来自于水性样品残留物只能溶于水中而不溶于有机溶剂。应使用水和醇类(例如甲醇、乙醇和异丙醇)来清洗键合的聚乙二醇基固定相,但一般不建议采用该方法。
下表列出了针对各种直径的色谱柱,建议使用的溶剂的体积。使用大量溶剂虽无害,但效果不会好很多,并且还十分浪费。加入第一种溶剂后,对清洗装置加压,但要低于20psig。使溶剂流速低于1ml/min。除大多数0.53mm内径的色谱柱外,在流速达到1ml/min之前清洗装置的压力将先达到20psi。如果使用的是比重较大或粘度较大的溶剂,或色谱柱长度长或内径小,则需要较长的清洗时间。第一种溶剂全部进入或大部分进入色谱柱中后,加入下一种溶剂。当开始加入第二种溶剂后,上一种溶剂不要完全赶出色谱柱。
最后一种溶剂流出色谱柱后,让加压的气体流入色谱柱5-10分钟,将色谱柱装入进样口,然后通入载气。将载气通入色谱柱5-10分钟。把色谱柱连接到检测器上(或也可以不接检测器)。使用程序升温,从40℃-50℃开始将色谱柱以2-3℃/min的速度达到温度上限。将此温度保持1―4个小时,直至色谱柱完全老化为止。
冲洗色谱柱的溶剂体积
色谱柱内径(mm)
溶剂体积(ml)
0.18-0.2
3-4
0.25
4-5
0.32
6-7
0.45
7-8
0.53
10-12
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私聊
dingshx
第1楼
2017/10/04
了解一下
0
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私聊
Kromasil鲲霆
第2楼
2017/10/18
里面的内容真的很不错
0
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