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液相缓冲盐的选择
lijing320323
2019/04/26
私聊
厂商论坛
什么时候需要缓冲溶液?
在反相色谱分析中,流动相的PH值一般在2.5-7之间,当分析物在反相条件下可离解,或样品的PH值在2.5-7之外时,就需要缓冲液,在反相条件下可离解的化合物一般有氨基和羧基,他们的Pka在1-11之间,选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团处于一种形式,离子形式或中性化合物的形式,如果样品的PH值对柱子有伤害,则缓冲溶液可使其变温和或减小其危害,
如何选择缓冲液PH值
在选择缓冲液PH值之前,应先了解被分析物的Pka,高于或低于Pka两个单位的值,有助于获得好的或尖的峰,从HH公式得知,溶液PH值高于或低于两个Pka两个单位,化合物99%以一种形式存在,而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰,
让我们通过一个离子来看如何选择PH值
例如苯甲酸,苯甲酸的Pka等于4.2,理论上讲当PH值等于2.2时,99%的苯甲酸以中性化合物存在,PH值等于6.2时99%的苯甲酸以离子形式存在,所以当缓冲液PH值等于2.2时,中性化合物以羧酸形式保留于反相柱,磷酸和柠檬酸缓冲液能用于PH等于2.2。
当化合物只有氨基时,缓冲体系的选择十分简单,大多数化合物在PH值小于9时都被质子化,所以所有PH值在7或更低时均适合应用,你也许会问水的PH值大约是7,为什么还用缓冲盐,因为缓冲液有助于增加方法的可靠性,以及的尖锐性,PH值降低有助于氨基化合物保留时间减小,减小化合物与硅胶表面硅羟基的作用,而使峰更尖锐,磷酸钾盐适合用于氨基化合物。
在一般情况下,他是含羧基,氨基化合物分析中最好的缓冲液,并且我们认为在氨基分析中钾盐比钠盐更好。
为离子对试剂选择缓冲液
为应用离子对试剂的方法选择缓冲液的过程是相似的,离子对试剂例如四丁基铵,十四烷基磺酸钠,在流动相中可与化合物中可离解的官能团配对,在缓冲液中以离子形式存在的化合物就需要应用离子对试剂。
应用缓冲液PH值来调节选择性
当氨基保留造势,氨基的保留随PH的减少而降低,这个特性可以用来调节选择性,如果两个化合物共流出,一个含有氨基,改变PH值可以用来分离这一物质对。由于可离解化合物的选择性依靠PH值,所以变化PH值可以用来鉴别未知化合物的官能团,如果PH值变小,出峰便快,化合物中可能存在氨基,当PH变大,化合物出峰很快,或处在死时间处,化合物可能存在的羧基离子。
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2019/04/29
缓冲盐可是要好好选选
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检测老菜鸟
第2楼
2019/05/05
应助达人
是的,要好好选择
0
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