急求：液质测定药物时峰面积重现性很差，回收率很低，请求解答与帮助

应助达人

质谱调谐时响应怎么样

应助达人

首先内标最好用同位素的；其次，如果没有同位素内标，尽量选性质和结构接近的物质，这样二者的液质测定方法才能最相似；最后，我觉得你的目标物的质谱参数可能没有优化好，建议再优化一下。

应助达人

待测物标准品的重复性、线性、信噪比好不好？

应助达人

最好选择同位素内标，而且内外标的测定条件最好一致。

您好，感谢您的解答，我刚接触液质不久，所以还有很多疑问，可能好些问题都比较低级，我还想请教您个问题：
1、我的药物是实验室自己合成的，是姜黄素(CUR)和d-α维生素E通过羧酸反应形成酯键接合的一种衍生物，所以找同位素内标比较困难，最后是选择的和CUR性质相近的尼索地平作为内标物，但条件优化时发现内标和CUR是负离子模式，我的药是正离子模式，所以在测定样品（CUR、尼索地平、我合成的药三者的混标）时，是正负离子同时测的，不知道像这样正负离子同时测会不会对不同药物的结果产生干扰？
2、关于重复性的问题，我还发现，我在液质条件不改变的情况下进同份样品（在保证样品稳定的前提下），可能昨天重复性结果还挺好，峰面积也正常，第二天结果就会突然变得特别差，难道是仪器不稳定，所以结果时好时坏，或是有什么其他原因？
3、另外，我优化过两次，最后都是选定的响应最高的子离子对应的液质条件，而且两次优化出的最高响应的子离子都是176.9 m/z，优化条件也相差不大，我在想会不会是虽然176.9m/z是响应最高的子离子，但它不一定是最稳定的那一块碎片，所以我测定样品时重复性差？之前和导师讨论过，他说CUR子离子是134 m/z，而且我的药又是d-α维生素E和CUR接合出的衍生物，所以我应该找出134m/z的子离子（与CUR子离子相同），这样才是最稳定的那块子离子碎片，您觉得呢？

您好，十分感谢您的解答，我不太明白您说的质谱调谐是什么意思，是否这种操作需要工程师来完成？但我现在用的这台液质，同时也有其他人在用，没有听其他人反应说他的样品重复性不好，那也就是说仪器应该是没有问题的咯？但偏偏我的样品在液质条件不改变的情况下进同份样品（在保证样品稳定的前提下），可能昨天重复性结果还挺好，峰面积也正常，第二天结果就会突然变得特别差，我也不知道是什么原因？还想向您请教，谢谢您。

您好，感谢您的热心解答，我还想请教您几个问题，还希望您有空时帮我解答：
1、我的药物是实验室自己合成的，是姜黄素(CUR)和d-α维生素E通过羧酸反应形成酯键接合的一种衍生物，所以找同位素内标比较困难，最后是选择的和CUR性质相近的尼索地平作为内标物，但条件优化时发现内标和CUR是负离子模式，我的药是正离子模式，所以在测定样品（CUR、尼索地平、我合成的药三者的混标）时，是正负离子同时测的，不知道像这样正负离子同时测会不会对不同药物的结果产生干扰？或是像您说的，我应该选择一个和我的药一样，是正离子检测模式的内标才对？

2、另外，我优化过两次，最后都是选定的响应最高的子离子对应的液质条件，而且两次优化出的最高响应的子离子都是176.9 m/z，优化条件也相差不大，我在想会不会是虽然176.9m/z是响应最高的子离子，但它不一定是最稳定的那一块碎片，所以我测定样品时重复性差？之前和导师讨论过，他说CUR子离子是134 m/z，而且我的药又是d-α维生素E和CUR接合出的衍生物，所以我应该找出134m/z的子离子（与CUR子离子相同），这样才是最稳定的那块子离子碎片，您觉得呢？谢谢您，期待您的回复。

应助达人

1. 现在的仪器对于正负离子同时测定倒是没有什么问题，但我个人总感觉待测物和其内标应该是用同种模式测定更加可靠。2.重复性差，是不是你在进样前没有将柱子充分平衡好，或者进完样没有将仪器系统冲洗干净导致的 3.你可以去指定子离子碎片去手动优化试试，看看134的响应如何。

多谢