SPE净化模式介绍

月旭

2019/09/25

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固相萃取（Solid Phase Extraction，简称SPE）,也称固相提取，是一项结合了选择性保留、选择性洗脱等过程的分离技术。 SPE也是一个柱色谱分离过程，分离机理、固定相和溶剂的选择等方面与高效液相色谱（HPLC）有许多相似之处。
SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出分析物，从而达到分离的目的。
SPE的净化模式主要取决于填充剂的类型和溶剂的性质，有以下2种：
模式一：保留目标物，去除杂质
固相萃取操作一般有四步（见下图1）：
1）活化--除去小柱内的杂质并创造一定的溶剂环境（注意整个过程不要使小柱干涸）。
2）上样--将样品用一定的溶剂溶解，转移入柱并使组分保留在柱上（注意流速不要过快，以1ml/min 为宜，最大不超过5ml/min）。
3）淋洗--最大程度除去干扰物（建议此过程结束后把小柱完全抽干）。
4）洗脱--用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集（注意流速不要过快，以1ml/min为宜）。

图1.保留目标物净化模式

绝大多数的样品都是用保留目标物的模式净化的，下面举个例子：
食品中乙二胺四乙酸二钠的检测，样品经提取，络合后，净化；
SPE柱：月旭 Welchrom®SAX 150mg/6mL；
活化：5 mL 甲醇、5 mL 水，弃去；
上样：待净化液全部上样，控制流速，不宜过快，弃去；
淋洗：依次用5mL水，5mL甲醇淋洗，抽干；
洗脱：5mL5%甲酸甲醇水洗脱，抽干，收集洗脱液定容至5mL，过0.22μm滤膜，供液相色谱仪测定。

图2、八宝粥样加标150mg/kg过柱图谱

模式二：保留杂质
固相萃取操作一般有三步（见图2）：
1）、活化--除去柱子内的杂质并创造一定的溶剂环境（注意整个过程不要使小柱干涸）。
2）、上样--将样品转移入柱，此时大部分目标化合物会随样品基液流出，杂质被保留在柱上，故此步骤要开始收集（注意流速不要过快）。
3）、洗脱---用小体积的溶剂将组分淋洗下来并收集，合并收集液（注意流速不要过快）.

图3.保留杂质净化模式

这种净化模式多用于食品或农残的检测，下面举个例子：
食品中丙烯酰胺的检测，样品经提后，净化；
SPE柱：月旭Welchrom® C18E 500 mg/6mL；
活化：5mL甲醇，5mL水；
上样：待净化液，收集；
洗脱：2mL30%甲醇分次润洗烧瓶，再上样，收集，抽干；
合并上样液和洗脱液，并用30%甲醇水定容至5mL，并过0.22 μm滤膜，上HPLC检测。

图4.咖啡样品加标10mg/kg