今天我们给大家带来的是婴幼儿配方食品（乳粉）中维生素D2+维生素D3的测定。一起来看具体的实验步骤吧~
适用范围
适用于婴幼儿配方食品（乳粉）中VD2+VD3的测定。参考标准：《GB 5009.82-2016 食品安全国家标准食品中维生素A、D、E的测定》。
提取步骤
称取1g样品于50ml刻度离心管中，加入5ml50%乙醇水溶液，5ml正己烷，涡旋混匀5min，9000r/min离心2min。取出上清液，向残渣中再加入5ml正己烷，重复提取一次；8000r/min离心2min，合并两次上清液，40℃氮吹至干，加入2-3ml甲醇溶解残渣，待净化。
SPE净化步骤
SPE柱：月旭Welchrom® BRP规格：200 mg/6mL；
活化：5mL甲醇，弃去；
上样：待净化液全部上样，接收流出液；
淋洗：5ml甲醇清洗试管后过小柱，接收流出液；
洗脱：加入5mL甲醇，抽干柱子，合并全部流出液；
浓缩：将洗脱液置于45℃水浴中氮吹至近干，甲醇定容至2ml，用0.22μm滤头过滤，作为HPLC供试样品，上机测定。
色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate® XB-C18，4.6×250mm,5μm；
流动相：乙腈：甲醇(10:90)；
流速：1.0mL/min；
柱温：30℃；
进样量：20μL；
波长：265nm。
谱图和数据
图1.婴幼儿配方食品（乳粉）样品空白图谱
图2.婴幼儿配方食品（乳粉）样品加标2.0mg/kg图谱
表1.加标回收表
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