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液相条件检测出峰问题，怎么解决？

carnivore

2019/12/02

同一个样品两种方法检测结果不一致
请教大家，同一个样品用两种液相色谱条件检测的结果不一致（归一化法），一个色谱条件是乙腈-0.1%磷酸=40:60，主峰保留时间为4min，杂质A含量约0.15%。另一个是乙腈-水（0.4%HAC，0.1%TEA）=44:56，主峰为16min，采集时间足够长，完全可以检测到A，但是杂质A没有出峰。柱子都是C18柱，牌子不一样。
另一个问题，做旋光测试时，同一份样品用两根长度不一样的旋光管，测出来结果偏差比较大，可能是什么原因？另外，同一批样品，配制两份溶液，旋光值测出来也不一样，为什么呢？

carnivore

第1楼2019/12/02

HPLC部分，你色谱柱的牌子不同，长度及内径，填料粒径相同否？若不同出峰时间肯定是不同的，若只这样，出峰早的杂质分不开是正常的。旋光测定时结果处理时有没有把光径计算进去？左旋右旋有没有考虑？还有放旋光管的方向？

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