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高效液相色谱一直出不来峰

echong1982

2020/01/16

C18柱，流动相是甲醇：乙腈=80：20，流速1ml/min,标样是麦角固醇乙醇溶液，两个星期前做过一次，11~12分钟出主峰。然而这次用同样的标品和流动相（标品和流动相新配的），以及操作条件跟之前一模一样，在3分钟左右有个很小的溶剂峰，再没有任何峰出来，连杂峰都没有。排除了可能出现的各种情况（因为柱压特高，超过了200，解决了管道中可能堵的地方，柱子用异丙醇冲了1h，乙腈冲了30min，甲醇冲了1h，水冲了1h,柱压降到大概90左右）但是依然只有溶剂峰，冲过之后，跑流动相柱压大概180（之前正常的柱压好像没有超过100），又怀疑柱子有问题，然后用同样的柱子跑我同门的样品（她的流动相主要是盐溶液，柱压大概130）能正常出峰。我的流速、UV设置、进样确定都是没有问题的，现在真的想不出哪里可能出问题。各位大神有没有遇到过类似的情况，或者能不能告诉我可能出现的情况。

echong1982

第1楼2020/01/16

重新配一下样品，可能是样品的问题，或者是柱子没有平衡好就进针了

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