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求助，液质方面

cfgong

2020/01/19

我现在在做激素的检测，标品比较多（30多种），现在质谱条件已经优化完了，质谱条件定了。
但是对于液相条件的优化，完全没有头绪，流动相A（0.1%甲酸水），B（甲醇），初始的梯度是65%的A，35%的B，时间是6min，仪器型号安捷伦1260-6410B，我想问一下液相条件的优化有什么可以参考的步骤吗，就是应该先进行那个？逐一地来，有条理的优化，还有就是梯度什么的怎么来慢慢的改变比较合适，时间的选择怎么确定，求大神指导，具体讲一下，谢谢。

cfgong

第1楼2020/01/19

质谱方法确定了，问题就不大了。
由于质谱的存在，液相的流动相只能加挥发性的添加剂。常见的有三氟乙酸，甲酸，氨水，甲酸铵等。
1、楼主确定用甲酸的话，就调整一下梯度吧，尽量把峰都分开。
试试先做个5%~95%B的梯度，看峰的保留时间，然后再逐步调整梯度。
2、B相建议优先考虑乙腈。乙腈的峰型比甲醇好。乙腈是在分不开，再考虑甲醇。
3、有条件的话，换不同的柱子试试。

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