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我的药HPLC对称因子总是不满足药典要求，求助各位大侠指教一下！

lpzscv

2020/03/02

hplc，在摸索一个自己实验室合成的新药（单一化合物）的液相条件，C18色谱柱，样品用纯甲醇溶，流动相甲醇-水，1ml/min，但出现主峰分叉的情况，不要预柱测的话峰不分叉但峰都前沿，换别的柱子后（有接预柱）没有出现峰分叉，请问这些情况是否说明我的柱子柱头污染或塌陷导致的峰分叉？？？另外我用流动相溶解样品后测，峰型改善很多，无分叉或肩峰现象，但对称因子不满足要求，试过在流动相中加酸或盐，无论样品用纯甲醇溶还是用流动相溶，都还是得不到满意结果，请各位大侠说说我该怎么办呀，跪求各位的建议啊！

lpzscv

第1楼2020/03/02

1、经过反复研究后（不同流动相、不同色谱柱），内标与主成分对称因子均接近0.95至1.05就可以了。实在达不到，峰形对称，方法验证能够过就可以的。建议你多看看USP中HPLC含量测定对系统适应性的要求，它更关注专属性，对对称因子要求没有这么严格。
2、你这个峰形没有问题，只要方法验证能够过。测定浓度也要合适，太大了（峰高做到上千）不可能达到要求的。
3、实在还想优化就换柱子。

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