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求助葡聚糖凝胶色谱LH-20流速问题
xxm0612
2020/03/11
私聊
测试版面
我的样品首先经过大孔树脂HP20粗分,然后再用LH20纯化,75%甲醇洗脱流速1ml/min,但是再洗柱子,逐步将洗脱液换成50%甲醇、25%甲醇、水、NaOH-NaCl溶液,发现在恒流泵转速一定的情况下,流速越来越慢,25%甲醇过渡的时候只有0.5ml/min不到,是不是LH20走水相的流速会很慢吗?还是因为洗脱液里面有杂质,导致柱子堵住了?恳请大家的帮助,这个问题困扰我太长时间了,查找了相关资料也没有解决,之前这样洗柱子还可以,但是现在流速越来越慢,感觉太影响实验速度了。
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私聊
xxm0612
第1楼
2020/03/11
LH20一般是用它的分子筛功能,等梯度洗脱为宜,越来越慢可能是因为换梯度后,溶胀系数不同,产生气泡,所以才会流速变慢
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