仪器信息网APP

选仪器、听讲座、看资讯

立即体验

当前位置：仪器社区 >色谱 > 液相色谱（LC） > 帖子详情

流动相pH影响（液相）

遗忘曲线

2021/08/12

液相色谱（LC）

我们经常讨论流动相的pH调节，最简单和最可靠的方法是在加入有机溶剂后的流动相再调节pH。还有测定pH是在流动相的盐相里面，这两种调节方式有何区别？
pH值的调整是通过缓冲溶液完成的，缓冲盐能够维持pH在某一范围内，这个叫做缓冲能力，缓冲能力因缓冲盐的pH和pka以及其浓度不同而变化，举个例子，乙酸的pKa是4.74(在水中)，因此，醋酸盐缓冲能力最好也是在这个pH,液相中常见的典型的缓冲盐浓度一遍是20-50 mM，因此在缓冲液pKa周围的+/-1pH单位内可以获得良好的缓冲能力，为了达到合理的缓冲能力，缓冲液的pH值与pKa之间的距离不应超过1.5个pH单位。如果有机溶剂加入到缓冲盐中，那pH将比原来测得更高，这是由于两个单独的影响。一个是由于有机溶剂存在时氢离子浓度的变化而导致的pH值的真正变化。第二个原因与测量pH的仪器自身有关，因为pH计在使用之前已经校准了，如果在存在高浓度有机溶剂的情况下进行测量，它将显示出与真实值的偏差。然而，这两种效果都与实际的的缓冲盐组成以及其缓冲能力无关，在有机溶剂存在的情况下，由酸性形式和缓冲成分的基本形式的给定比例制备的缓冲溶液仍然具有相同的比例，因此缓冲能力与在纯水中相同。因此，如果我们测量水中的缓冲液组成及其pH值，我们就有了一个固定不变的参考点，以及无可置疑的工具来测量pH值。例如，醋酸盐缓冲液的最大缓冲能力为pH4.75。当有有机溶剂存在时，当pH计读数为pH值时，可以将水中的pH值调节到此值的醋酸缓冲液达到最大缓冲能力。对于所有常用的缓冲区，我可以在表中查找水的pKa值。然后，我可以用pKa作为参考点来调整缓冲液在水中的pH值。然后，作为最后一步，我加入有机溶剂。然而，这个规则也有例外的时候，如果你用有关很老的方法开发一个相对较老的方法，它可以指定一种长链胺作为缓冲区的组成部分，有时候，胺在水里面的溶解度是有限的，配制流动相溶液最简单的方式就是在加有机相溶液前调节pH值，这个过程没有什么问题，只要你知道滴定曲线和你使用的缓冲盐在有机溶剂存在下的缓冲能力，获取这些信息的最佳方法是在有机溶剂目标浓度下获得滴定曲线，并从该滴定曲线构造缓冲能力的线性。滴定曲线是当酸或者碱加到溶液时溶液中不同pH变化的点连接起来的一种曲线，缓冲能力曲线是每添加的碱量与pH的（负）变化的曲线。这个曲线在有机溶剂存在的条件下，在缓冲盐的pKa处达到最大值，因此，缓冲盐的缓冲能力最大处是在其pKa处，然后，你可以使用此信息为具有最佳容量的分析准备一个缓冲区。该行业的首选做法是在水中配制缓冲液，然后将pH调整后的缓冲液与有机溶剂混合。这给出了明确的结果，并允许对缓冲盐的缓冲能力作出良好的和普遍的判断。应当指出，在起草流动相等方案时候写清楚其配制过程，应该包括缓冲盐类型及其pH值与有机溶剂等的比例。下面是一个例子：50mMKH2PO4/K2HPO4缓冲盐，pH 7.0/甲醇 40/60，或者40% 50mMKH2PO4/K2HPO4缓冲盐，pH 7.0和60%甲醇，这种反过来的描述（methanol /KH2PO4/K2HPO4buffer, pH 7.0, 60/40”）有时候很模糊，这个绝对不能采用，你的建议不同于我最初的想法，但它是有道理的。具有溶剂组成的pH的典型变化是什么？如果缓冲液在添加有机溶剂之前或之后制备，则会引起可测量的保留变化。在参考文献中，酸的pKa 在100%水中与50%甲醇水中相差1个单位，碱的pKa 在100%水中与50%甲醇水中相差接近0.5个单位，如果分析物质不完全离子化或者非离子化，那么这点差异将会造成保留时间的漂移，甚至改变出峰顺序也是有可能的。

相关话题

m3052135

第1楼2021/12/27

你能芣把摘抄的原文章来源注明一下，其他人也好学习一下。不同浓度的有机相下一ph值是不用的，这需要校正。

1

dadgoh

第2楼2021/12/28

应助达人

感谢分享！

0

zhaohua8011

第3楼2022/01/01

缓冲液pKa周围的 /-1pH单位内可以获得良好的缓冲能力，对于分离度峰形都有影响

0

近期热榜

热门活动

猜你喜欢最新推荐热门推荐

品牌合作伙伴

6月26日马尔文帕纳科现场直播间

日立科学仪器

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）

日本电子株式会社

赛默飞世尔科技

马尔文帕纳科

上海仪电科仪

梅特勒托利多

布鲁克核磁

举报帖子

点赞用户

好友列表

加载中...

正在为您切换请稍后...