HILIC柱使用

应助达人

楼主，这个柱子对极性大的化合物，都还是有比较好的保留，例如，糖类，酸类，生物碱类，个人觉得hilic柱的洗脱原理有点类似正相柱用反向体系的意思，水的比例越高，洗脱能力越强，所以起始比例一般都是95%的乙腈，但是水一般也不会超过50%，具体使用注意事项可以参考附件文献资料。

应助达人

在使用HILIC色谱柱时，流动相的使用有以下几点需要注意:(1)总是保持体积分数至少5%的极性溶剂在流动相体系中或梯度流动相中(如5%水、5%甲醇或2%水+3%甲醇等)，这将保证HILIC色谱填料始终处于水合状态;(2)在流动相体系或梯度中至少需要有机溶剂(如乙腈)体积分数40%以上;(3)与甲酸或乙酸添加剂相比，甲酸铵或乙酸铵缓冲溶液可以得到重现性更好的结果，如果方法中一定要用甲酸或乙酸，应该用0.2%(v/v))而不是0.1%（v/v);(4)要得到最好的峰形，应使流动相梯度中缓冲液的浓度始终保持在一个水平（5）将流动相中的水换成其它极性溶剂如甲醇、乙醇或异丙醇能提高保留。使用HILIC柱优化洗脱条件时，可以先使用一个梯度条件(从体积分数95%乙腈至50%乙腈的梯度)，如果没有保留，则用体积分数95%:3%:2%的乙腈:甲醇:水相进行等度分析。使用HILIC柱时，两针进样的间隔需要至少10倍柱体积的初始流动相平衡色谱柱，否则会造成保留时间的漂移。