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液相色谱常见问题Q&A之基线异常
大耳朵兔兔
2022/03/25
私聊
液相色谱(LC)
基线问题是色谱中通常碰到比较多的问题,处理起来相对简单。基线不正常,对实验的结果影响很大,甚至可能导致实验没办法进行下去。一般基线问题主要分为基线漂移和基线噪音两方面。
基线漂移:
问:造成基线漂移的主要原因有哪些?
答:(1)
环境温度波动,尤其是对于一些灵敏度很高的检测器,如示差检测器,电导检测器影响更大;(2)
色谱柱或检测器未平衡好,通常碰的比较多的是氨基柱,氨基柱的平衡需要的时间比一般色谱柱都要长一些;(3)
流动相不均一,互溶性不太好;(4)
流动相,色谱柱,流通池污染;
Tips:
如果是检测器污染,可以选择强溶剂,如甲醇乙腈冲洗,必要时可选择1N硝酸溶液冲洗;
(1) 样品中有强保留物质,洗脱慢,类似基线漂移;
(2)流动相比例或流速发生变化;
基线噪音:
问:基线噪音产生的主要原因有哪些?
答:(1)流动相脱气不完全,泵,管路,色谱柱或检测器中有空气;(2)流动相互溶性不好,混合不完全;(3)流动相,色谱柱或检测器污染;(4)系统有漏液;(5)紫外检测器氘灯能量不够;(6)使用紫外检测器时,选择的检测波长在溶剂紫外吸收截止波长附近;(7)数据采集频率过高(这个比较容易被忽视);
TIPs:
在日常实验中,造成基线问题最大的原因就是污染,包括色谱柱,流动相,系统管路和检测器。因此养成良好的实验习惯,如每天实验完之后及时冲洗干净色谱柱,定期对仪器系统进行清洗或者更换部件等,尽可能避免基线问题的出现。
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