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高效液相为什么一个样品跑出来两个峰

  • Ins_7a7c4968
    2022/05/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位老师专家好,我想请教各位,为什么我的一个样品进液相跑,会出来两个峰,不同浓度的样品峰型一样,峰面积也成比例,谢谢各位老师解答。
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  • JOE HUI

    第1楼2022/05/19

    应助达人

    楼主,跑纯流动相会不会有?,液相色谱出现“双峰”的原因很多,比如进样残留,进样针,色谱柱、溶剂、进样量、样品特性和pH值。? 以色谱柱为例,
    分析单一纯物时,如果每个色谱峰都出现双峰,可以确定是色谱柱头受损或者是柱头污染了。可以将色谱柱反过来接,用流动相或其它溶剂冲洗掉堵在柱头的残留物,然后再反过来,一般都能解决。

    ??????? 像溶剂问题问题,
    ??????? 反相色谱流动相多为甲醇、乙腈、水,实验中往往会从中加各种添加剂以改善分离性能。有时候为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液,但是缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化,从而产生双峰现象。可以更换缓冲液或者更换流动相试一试。

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  • 123

    第2楼2022/05/19

    应助达人

    第一,样品问题,有的时候样品放置时间久了就容易降解,或者反应。可能主成分分解出了杂质。所以现配现用几个样品看看情况。

    第二,你的溶剂不对,可能是溶剂的pH值或者极性不一致,所以导致了一个物质出现叉峰。最好的溶剂是流动相,比如偶尔偷懒用纯乙腈配样,可能就会出现叉峰。这是样品的极性导致的问题。

    第三,色谱柱的问题。色谱柱的填料坍塌可能导致色谱峰出现肩峰。这样你色谱图中的每个色谱峰的峰型都会有所影响。可以重生色谱柱试试看。

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  • xiaolanzi5

    第3楼2022/05/19

    应助达人

    您这个目标物有没有同分异构情况

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  • Ins_7a7c4968

    第4楼2022/05/20

    谢谢老师哈,今天再摸索摸索

    JOE HUI(xurunjiao5339) 发表:楼主,跑纯流动相会不会有?,液相色谱出现“双峰”的原因很多,比如进样残留,进样针,色谱柱、溶剂、进样量、样品特性和pH值。? 以色谱柱为例, 分析单一纯物时,如果每个色谱峰都出现双峰,可以确定是色谱柱头受损或者是柱头污染了。可以将色谱柱反过来接,用流动相或其它溶剂冲洗掉堵在柱头的残留物,然后再反过来,一般都能解决。??????? 像溶剂问题问题,??????? 反相色谱流动相多为甲醇、乙腈、水,实验中往往会从中加各种添加剂以改善分离性能。有时候为了样品的溶解性或稳定性加入了一点的缓冲液,但是缓冲液的酸碱性可能会导致样品转化,从而产生双峰现象。可以更换缓冲液或者更换流动相试一试。

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  • Ins_7a7c4968

    第5楼2022/05/20

    谢谢老师哈,换了根色谱柱还是同样的情况,我今天再试试其他方法

    123(m3149125) 发表:第一,样品问题,有的时候样品放置时间久了就容易降解,或者反应。可能主成分分解出了杂质。所以现配现用几个样品看看情况。第二,你的溶剂不对,可能是溶剂的pH值或者极性不一致,所以导致了一个物质出现叉峰。最好的溶剂是流动相,比如偶尔偷懒用纯乙腈配样,可能就会出现叉峰。这是样品的极性导致的问题。第三,色谱柱的问题。色谱柱的填料坍塌可能导致色谱峰出现肩峰。这样你色谱图中的每个色谱峰的峰型都会有所影响。可以重生色谱柱试试看。

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  • Ins_7a7c4968

    第6楼2022/05/20

    应该没有的

    xiaolanzi5(xiaolanzi5) 发表:您这个目标物有没有同分异构情况

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  • dadgoh

    第7楼2022/05/20

    应助达人

    有可能样品有变化了,重配样品看看。

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  • myoldid

    第8楼2022/05/20

    应助达人

    不同浓度的样品峰型一样,峰面积也成比例,换了柱子也是这个鸟样,那就说明这个物质就是不纯,要么是分解了要么本来就不纯,或者是有异构体。如果有DAD检测器,可以扫一下,看看两个峰的光谱图是否类似

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  • xiaolanzi5

    第9楼2022/05/20

    应助达人

    那有可能这两个峰代表不同物质,也就是本身您的样品中就含这两种物质,或者本身是一个物质但色谱条件或储存条件不宜,降解成生成的代谢物,比如之前我们做的异噁唑草酮就是这样,容易降解生成DKN。

    Ins_7a7c4968(Ins_7a7c4968) 发表:应该没有的

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  • 安平

    第10楼2022/05/21

    应助达人

    楼主具体分析什么样品?具体采用什么分析条件?

    什么柱子和流动相?


    某些物质存在异构体,可能会出多个峰,未必有问题

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