柱子相同，保留时间拖后分离度反而不好

应助达人

可能是色谱柱的柱效发生变化了，或者流动相的pH值有变化等等因素

分离度等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比，保留时间变大，但是峰宽变大也会导致分离度变小。
影响色谱仪色谱峰带宽的因素有柱内因素和柱外因素。

一、柱内因素：

1、动力学因素：

（1）涡流扩散：由于组分分子受到固定相颗粒的阻碍，在流动过程中不断改变运动方向，同一组分的不同分子通过填料的时间不一致，引起谱带展宽。

（2）分子纵向扩散：由于待测组分在色谱柱中存在浓度差，产生分子纵向扩散。

（3）流动相传质阻力：组分分子由流动相移向固定相表面进行两相之间的质量交换时受到的阻力。

（4）固定相传质阻力：组分分子由两相界面到固定相内部进行分配又返回两相界面的过程中受到的阻力。

2、热力学因素：

（1）非线性色谱分配等温线：若分配平衡属于非线性等温线，则形成不对称的前延峰或拖尾峰，使峰宽增加。这种作用对色谱峰基线宽度的影响比对半峰宽的影响大。

（2）固定相活性吸附中心：若固定相存在活性吸附中心，当样品量大时，载体表面强吸附活性中心被部分组分分子覆盖，不再承担分配平衡的任务；当样品量小时，载体表面活性吸附不被覆盖，参与分配平衡，使被吸附的分子向前迁移地特别慢，造成拖尾。

固定相活性吸附中心的影响随着组分在柱中停留时间增加而增加，其对峰宽的影响也随着保留值的增加而增加。

二、柱外因素：

柱外因素对峰宽的影响是固定的，对不同保留值的峰有相同的影响，但影响的相对大小不同。

1、死体积：

（1）柱前后的连接管道：这些死体积相当于加大柱长，组分在色谱体系中的停留时间增加，使谱带展宽。这些死体积的影响要比理论估计大得多。

（2）进样器的死体积：进样器的体积使组分浓度在进样器内稀释。对于气相色谱仪，特别指气化器的死体积。

（3）检测器的死体积：检测器的体积使组分浓度在检测器内稀释，若其体积超过峰体积，谱带展宽特别严重，使痕量组分不能检出。

2、进样量：

进样量的大小对初始带宽有直接影响。

3、进样方式：

非瞬间进样会造成色谱初始带宽。

4、进样浓度。

5、检测仪器的信号记录时间常数。

应助达人

楼主详细描述一下具体的分析条件为好。详细描述一下具体的样品情况为好。


两个谱图，是修改了分析条件之后的结果么？

还是运行一段时间之后的结果？

详细说明为好。

色谱分析条件是否相同？流速有没有调小

应助达人

峰型明显有前展宽，这个位置应该不是溶剂效应了，可能柱效降低了

咨询工程师

问工程师解决

保留时间长了 色谱峰更宽 分离度下降

换流动相比例试试。或者增加流速