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液相色谱连接自动进样器峰行拖尾

  • guoguoguog
    2022/06/24
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 用手动进样器进样峰形可以,连接自动进样器之后峰形出现拖尾

    色谱柱:Mars120 C18 5.0μm250mmX4.6mm

    液相色谱:北京温分LC98I,自动进样器

    流动相:甲醇+水=40+60,进样20微升,流速0.8,波长260nm
    对自动进样器进行更换,峰依然拖尾,对自动进样器进样路线调整缩短,依然拖尾,不知道是哪里的原因
    手动进样器峰


    自动进样器峰

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  • 123

    第1楼2022/06/24

    应助达人

    进样针内有污染或不干净

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  • wuyuzegang

    第2楼2022/06/24

    应助达人

    峰拖尾的可能原因及解决方法如下:
    1. 柱超载:降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相
    2.峰干扰:清洁样品 , 调整流动相
    3.硅羟基作用:如果对照品是偏酸性的,流动相加0.1%醋酸;如果对照品是偏碱性的,流动相应加少量三乙胺。
    4.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品
    5.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件
    6.死体积或柱外体积过大:连接点降至最低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管
    7.柱效下降:用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱
    8.保护柱污染:把保护柱拆卸下来 箭头向上在水里超声一下,然后把管路在不接柱子的情况下用1:1二甲基亚酚水溶液清洗,以确保没有管路的洁净。
    9.样品问题:弱酸弱碱物质的解离。
    10.流动相:是否干净,是否产生微生物。
    11.样品制备:样品制备方法是否得当。
    12.色谱柱污染:a.解决办法:采用异丙醇约20倍以上柱体积冲洗。
           b.对于蛋白质污染:使用1%乙酸溶液再生。
           c.重金属污染:使用1%EDTA溶液过柱络合后除去。
           d.非可溶性杂质:将分析柱和保护柱分别倒装(一次洗一个)后低流速冲洗,如果还不行 只能将柱头筛板和保护柱芯卸下来倒置超声一下。
    13.缓冲盐缓冲能力不够:加入缓冲溶液,

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  • 安平

    第3楼2022/06/24

    应助达人

    楼主与具体连接方式的照片么?

    自动进样器的in和out两根管路,是不是接反了?

    详细说明具体情况为好。

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  • 活到九十 学到一百

    第4楼2022/06/24

    两张图的响应值明显不一样,不知道是标准溶液浓度不同还是进样量不一样造成的?自动进样的响应值明显变大,有可能是过载造成的拖尾。降低标准溶液浓度或减少进样量再试一下看看。

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  • 安平

    第5楼2022/06/27

    应助达人

    如果手工进样正常,那么可以排除色谱柱或者检测器的问题。


    重点考虑自动进样器自身或者连接方式为好。

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