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赛默飞不同型号液相的背景压力问题

  • Ins_8f73a189
    2022/12/15
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 各位同行、老师好,我这边想请教下一个问题,我们有赛默飞的一台Vanquish Core型和Ultimate 3000型的液相,但是在使用超纯水,1ml/min流速,接二通下,U3000的压力只有不到10bar,而Vanquish Core的压力可达到28bar,请问是大概什么原因造成这么大的压力变化?(虽然是不同型号,可能存在管路、硬件不同,有压力差异可接受,但已经差异比较大了)
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  • 歌名

    第1楼2022/12/15

    应助达人

    各位同行、老师好,我这边想请教下一个问题,我们有赛默飞的一台Vanquish Core型和Ultimate 3000型的液相,但是在使用超纯水,1ml/min流速,接二通下,U3000的压力只有不到10bar,而Vanquish Core的压力可达到28bar,请问是大概什么原因造成这么大的压力变化?(虽然是不同型号,可能存在管路、硬件不同,有压力差异可接受,但已经差异比较大了)------------------------vanqush系统压力普遍比U3000系统压力大几十bar,正常的,我这边也是这种情况,这个跟LC管路、泵、各个部件有关

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  • Ins_8f73a189

    第2楼2022/12/16

    明白了,感谢!现在我们主要出现的一个问题是,用C4柱检一个蛋白质类的化合物,两台不同型号的仪器的保留时间差了有10min,但其他化合物没有那么明显的差异,当时就看到相同的流动相、色谱柱下的压力差异达到30bar,以为是仪器异常导致的,所以相同的分析条件在不同的型号液相检蛋白类化合物为什么有这么的保留时间差别?

    歌名(Ins_eedcdc41) 发表:各位同行、老师好,我这边想请教下一个问题,我们有赛默飞的一台Vanquish Core型和Ultimate 3000型的液相,但是在使用超纯水,1ml/min流速,接二通下,U3000的压力只有不到10bar,而Vanquish Core的压力可达到28bar,请问是大概什么原因造成这么大的压力变化?(虽然是不同型号,可能存在管路、硬件不同,有压力差异可接受,但已经差异比较大了)------------------------vanqush系统压力普遍比U3000系统压力大几十bar,正常的,我这边也是这种情况,这个跟LC管路、泵、各个部件有关

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  • 歌名

    第3楼2022/12/16

    应助达人

    方便的话可以把化合物贴出来,有些化合物与其携带的官能团很敏感,系统稍有差异就会导致色谱行为偏离,很多时候这种小的差异引起还很难排查的

    Ins_8f73a189(Ins_8f73a189) 发表: 明白了,感谢!现在我们主要出现的一个问题是,用C4柱检一个蛋白质类的化合物,两台不同型号的仪器的保留时间差了有10min,但其他化合物没有那么明显的差异,当时就看到相同的流动相、色谱柱下的压力差异达到30bar,以为是仪器异常导致的,所以相同的分析条件在不同的型号液相检蛋白类化合物为什么有这么的保留时间差别?

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  • Ins_8f73a189

    第4楼2022/12/16

    化合物是重组人生长激素,蛋白质类结构比较复杂,老师您可网上看下,流动相是0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(pH7.5)-正丙醇(约为71:29),色谱柱是C4,之前检验的经验表示该蛋白质对有机相的含量比较敏感,例如变化1%也可能导致保留时间漂移2~3分钟。

    歌名(Ins_eedcdc41) 发表: 方便的话可以把化合物贴出来,有些化合物与其携带的官能团很敏感,系统稍有差异就会导致色谱行为偏离,很多时候这种小的差异引起还很难排查的

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  • dadgoh

    第5楼2022/12/16

    应助达人

    压力差异可能是特定的流动相与不同阻尼器孔径有关。

    Ins_8f73a189(Ins_8f73a189) 发表: 明白了,感谢!现在我们主要出现的一个问题是,用C4柱检一个蛋白质类的化合物,两台不同型号的仪器的保留时间差了有10min,但其他化合物没有那么明显的差异,当时就看到相同的流动相、色谱柱下的压力差异达到30bar,以为是仪器异常导致的,所以相同的分析条件在不同的型号液相检蛋白类化合物为什么有这么的保留时间差别?

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  • p3057334

    第6楼2022/12/19

    Vanquish Core是不是超高压液相了

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  • Insp_018d75f8

    第7楼2023/01/03

    两台仪器是二元泵,还是四元泵,看一下泵的类型是否一致,你说这个蛋白对有机相变化比较敏感,你说的比例是约为71:29?那两次流动相是否完全一致,这也可能导致保留时间差异比较大,另外,看你测的是蛋白生物类物质,据我了解Vanquish Core不是生物液相,U3000你的型号是生物液相吗,这个可能会有影响

    Ins_8f73a189(Ins_8f73a189) 发表: 化合物是重组人生长激素,蛋白质类结构比较复杂,老师您可网上看下,流动相是0.05mol/L三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(pH7.5)-正丙醇(约为71:29),色谱柱是C4,之前检验的经验表示该蛋白质对有机相的含量比较敏感,例如变化1%也可能导致保留时间漂移2~3分钟。

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