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峰是平的没有尖

  • Ins_0d3b3aac
    2023/05/31
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 流动相:磷酸盐和乙腈(89:11),紫外检测波长:254nm,测定叶酸,之前用标准品进样,保留时间都在2.5min左右,下图是实际样品,在2.5min也有一个峰,但是峰是平的没有尖,而且峰面积特别大,带入进去算出来的结果,比文献上的参考高出几百倍,想问问大家知道是啥情况吗,下一步应该怎么办比较好。
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  • Insm_c709caaf

    第1楼2023/05/31

    这应该是浓度高了超出检测容量,可以稀释一下再进样试试

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  • Insm_c709caaf

    第2楼2023/05/31

    再有就是保留时间太短,溶剂中其它不保留的组分可能会有一定的干扰,建议调节流动相使保留时间延长。

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  • dadgoh

    第3楼2023/05/31

    应助达人

    有可能是仪器量程超栽了,稀释一下样品试试。

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  • Ins_0d3b3aac

    第4楼2023/05/31

    但是看现在的结果,把峰面积代入进去之后,得出的浓度,已经比文献里面要高几百倍了,是不是可以确定里面有其杂质,请问还有必要稀释吗

    Insm_c709caaf(Insm_c709caaf) 发表:这应该是浓度高了超出检测容量,可以稀释一下再进样试试

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  • Ins_0d3b3aac

    第5楼2023/05/31

    就是现在根据标准曲线算出的浓度,已经远远超过正常浓度了,如果稀释过之后再算的话,浓度可能会更高吧,那还需要稀释吗

    dadgoh(dadgoh) 发表:有可能是仪器量程超栽了,稀释一下样品试试。

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  • Ins_0d3b3aac

    第6楼2023/05/31

    还想请问一下,实际样品里面加入淀粉酶,蛋白酶,和大鼠血清,这些会不会对峰面积有影响呢,加这些好像是为消除其它杂质,让叶酸更好地释放出来,但其实不太懂加这些酶的用量标准

    Ins_0d3b3aac(Ins_0d3b3aac) 发表:但是看现在的结果,把峰面积代入进去之后,得出的浓度,已经比文献里面要高几百倍了,是不是可以确定里面有其杂质,请问还有必要稀释吗

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  • Ins_0d3b3aac

    第7楼2023/05/31

    流动相用的是磷酸盐:乙腈89:11,调节比例有什么建议吗

    Insm_c709caaf(Insm_c709caaf) 发表:这应该是浓度高了超出检测容量,可以稀释一下再进样试试

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  • Insm_c709caaf

    第8楼2023/05/31

    一个分析方法线性是有范围的,现在这个浓度明显超出仪器检测能力了 稀释后进样从峰形结构可以看出是不是有其它组分没有分离开,有条件的仪器可以直接计算峰组分的纯度。

    Ins_0d3b3aac(Ins_0d3b3aac) 发表:就是现在根据标准曲线算出的浓度,已经远远超过正常浓度了,如果稀释过之后再算的话,浓度可能会更高吧,那还需要稀释吗

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  • Insm_c709caaf

    第9楼2023/05/31

    可以提高有机相比例试试出峰结果怎么样

    Ins_0d3b3aac(Ins_0d3b3aac) 发表:流动相用的是磷酸盐:乙腈89:11,调节比例有什么建议吗

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  • 洋葱先生

    第10楼2023/05/31

    可以做空白样验证啊

    Insm_c709caaf(Insm_c709caaf) 发表:一个分析方法线性是有范围的,现在这个浓度明显超出仪器检测能力了 稀释后进样从峰形结构可以看出是不是有其它组分没有分离开,有条件的仪器可以直接计算峰组分的纯度。

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