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国标5750莠去津的波长问题

  • Insm_a280307d
    2023/08/29
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 国标以及部分文献用的是254nm波长,但是我自己摸的条件是220nm有最强吸收,甚至10倍于254nm,然后部分文献也确实是用220nm的。造成这个区别的原因是什么呢?我的机器是waters acquity UPLC,超高压液相,柱子是最常见的BEH c18柱,检测器是PDA。有没有可能PDA和UV检测器对同一种物质的最佳检测波长有区别?
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  • 通标小菜鸟

    第1楼2023/08/29

    应助达人

    在选择波长的时候不是说最大吸收波长就是最佳的,特别是你用的是watersUPLC,检测器灵敏度很高,你如果用最大吸收波长,浓度很小响应就很高,很容易造成检测器过载,特别是高浓度样品会出现平头峰。所以在选择波长的时候还是要看这个物质在检测器上的实际响应,不是每一个物质都选最大吸收波长,对于响应很高的物质,可以选择中等吸收波长,254nm较220nm有一个好处是背景噪音小,越是高波长,越不容易受溶剂等背景吸收干扰,在响应足够满足测试要求的时候,选择其次的吸收波长才是最佳。

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  • myoldid

    第2楼2023/08/29

    应助达人

    你有PDA检测器,就可以提取一下莠去津的紫外吸收曲线,应该可以看到220nm和254nm都有吸收而且220还高于254.但是220nm只是比乙腈190、甲醇205大了点点。选用254nm就可以完美避开截止波长以及溶剂不纯,从而减小基线噪声。PDA和UV检测器对同一种物质的最佳检测波长是没有区别的,但是PDA和UV对同一浓度的物质,响应确实不同。我们用的安捷伦VWD和DAD对同一浓度的物质检测,VWD会高一些,这可能和灯能量有关

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  • Insm_a280307d

    第3楼2023/08/29

    谢谢,我也这样想过,主要是响应值差得太多,有些不太理解

    通标小菜鸟(v3141805) 发表:在选择波长的时候不是说最大吸收波长就是最佳的,特别是你用的是watersUPLC,检测器灵敏度很高,你如果用最大吸收波长,浓度很小响应就很高,很容易造成检测器过载,特别是高浓度样品会出现平头峰。所以在选择波长的时候还是要看这个物质在检测器上的实际响应,不是每一个物质都选最大吸收波长,对于响应很高的物质,可以选择中等吸收波长,254nm较220nm有一个好处是背景噪音小,越是高波长,越不容易受溶剂等背景吸收干扰,在响应足够满足测试要求的时候,选择其次的吸收波长才是最佳。

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  • Insm_a280307d

    第4楼2023/08/29

    谢谢,最初是3D数据选出220最高的,主要是比国标254高了10倍以上,有些不理解

    myoldid(v2963297) 发表:你有PDA检测器,就可以提取一下莠去津的紫外吸收曲线,应该可以看到220nm和254nm都有吸收而且220还高于254.但是220nm只是比乙腈190、甲醇205大了点点。选用254nm就可以完美避开截止波长以及溶剂不纯,从而减小基线噪声。PDA和UV检测器对同一种物质的最佳检测波长是没有区别的,但是PDA和UV对同一浓度的物质,响应确实不同。我们用的安捷伦VWD和DAD对同一浓度的物质检测,VWD会高一些,这可能和灯能量有关

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