糖皮质激素检测国内标准比较解读

hujiangtao

2023/10/05
鹤壁农检联合队

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兽药/抗生素检测

糖皮质激素检测国内标准比较解读

糖皮质激素是一种甾体类化合物，具有抗炎和免疫抑制作用。其分子结构共同特征为含17个碳原子的环戊烷并多氢菲母核，C₁₀和C₁₃位甲基、C₁₇位二碳侧链、C₃位酮基、C4-C5位双键。研究表明，糖皮质激素可以通过刺激肝细胞合成葡萄糖从而导致血糖升高，还可能降低人体免疫力，因此国家制定了一系列食品、化妆品中糖皮质激素检测方法标准，主要包括液相色谱-串联质谱法和酶联免疫法，现将国内相关主要检测标准总结如下：

序号	标准名称	检测原理	药物数量、种类
1	GB/T 22957-2008 河豚鱼、鳗鱼及烤鳗中九种糖皮质激素残留量的测定液相色谱-串联质谱法	试样中加入无水硫酸钠，用乙酸乙酯提取浓缩，过硅胶固相萃取柱，液相色谱-串联质谱仪测定。	9 种：泼尼松龙、泼尼松、氢化可的松、可的松、甲基泼尼松龙、倍他米松、地塞米松、倍氯米松、醋酸氟氢可的松
2	农业部1031号公告-2-2008 动物源性食品中糖皮质激素类药物多残留检测液相色谱-串联质谱法	组织样品用NaOH碱液水解后再用乙酸乙酯提取；牛奶、鸡蛋等液体样品直接用乙酸乙酯提取，硅胶相萃取柱净化，高效液相色谱-串联质谱ESI负离子模式检测。	8 种：泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、氟氢可的松、甲基泼尼松、倍氯米松、氢化可的松
3	农业部1063号公告-5-2008 饲料中9种糖皮质激素的检测液相色谱-串联质谱法	试样用甲醇振荡提取浓缩后，用碳黑-氨基固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱仪测定。	9 种：泼尼松龙、泼尼松、甲基泼尼松龙、氢化可的松、倍氯米松、地塞米松、倍他米松、醋酸氟氢可的松、醋酸可的松
4	农业部1068号公告-2-2008 饲料中5种糖皮质激素的测定高效液相色谱法	试样用甲醇振荡提取浓缩后，用活性炭-氨基固相萃取柱净化，高效液相色谱分离，紫外检测器测定。	5 种：泼尼松、醋酸可的松、甲基泼尼松龙、倍氯米松、氟氢可的松
5	SN/T 2222-2008 进出口动物源性食品中糖皮质激素类兽药残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法	试样加入醋酸铵缓冲溶液和β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶水解，乙酸乙酯提取，HLB固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱仪测定。	7 种：曲安西龙、泼尼松龙、氢化可的松、泼尼松、地塞米松、氟米松、曲安奈德
6	农业部1063号公告-1-2008 动物尿液中9种糖皮质激素的检测液相色谱-串联质谱法	试样中糖皮质激素类药物经醋酸铵缓冲溶液和β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶水解，酸性条件下用乙酸乙酯提取，HLB-氨基固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法测定。	9 种：泼尼松龙、泼尼松、甲基泼尼松龙、氢化可的松、倍氯米松、地塞米松、倍他米松、醋酸氟氢可的松、醋酸可的松
7	GB/T 24800.2-2009 化妆品中四十一种糖皮质激素的测定液相色谱/串联质谱法和薄层层析法	霜膏类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，精油类化妆品用正己烷分散，用乙腈从分散液中提取激素类药物，用亚铁氰化钾和醋酸锌沉淀蛋白等大分子基质，经HLB固相萃取柱净化，用反相高效液相色谱-串联质谱法测定。	41 种：曲安西龙（包括双醋酸酯）、泼尼松龙（包括醋酸酯）、氢化可的松（包括醋酸酯、丁酸酯、戊酸酯）、倍氯米松（包括双丙酸脂）、地塞米松（包括醋酸酯）、倍他米松（包括醋酸酯、双丙酸脂）、泼尼松（包括醋酸酯）、可的松（包括醋酸酯）、甲基泼尼刘松（包括醋酸酯）、氟米松、倍氯米松、曲安奈德、氟氢缩松、氟米龙（包括醋酸酯）、地夫可特、氟氢可的松（包括醋酸酯）、布地奈德、氟轻松醋酸酯、二氟拉松双醋酸酯、泼尼卡酯、哈西奈德、阿氯米松双丙酸脂、安西奈德、氯倍他索丙酸脂、氟替卡松丙酸脂、莫米他松糠酸酯、氯倍他松丁酸酯
8	SN/T 2533-2010 进出口化妆品中糖皮质激素类与孕激素类检测方法	化妆品汇总糖皮质激素采用乙腈超声提取，HLB固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法检测。	17 种：曲安西龙、泼尼松龙、氢化可的松、甲泼尼松龙、地塞米松、氟米松、曲安奈德、氟轻松、醋酸氢化可的松、醋酸泼尼松、醋酸地塞米松、哈西奈德、17α-羟基醋酸去氧皮质酮、丙酸倍氯米松
9	SN/T 4141-2015 畜及畜产品中糖皮质激素残留量检测方法酶联免疫法	本方法测定是基于竞争性酶联免疫反应：微孔板上包被有绵羊抗兔IgG的抗体，加入特异性抗体（免抗地塞米松抗体）、酶标记泼尼松龙、地塞米松标准品或样品提取液后，特异性抗体与包被的绵羊抗兔IgG抗体结合，同时游离糖皮质激素和酶标记泼尼松龙竞争性的和与特异性抗体结合，通过洗涤除去未结合的糖皮质激素的酶标记泼尼松龙，然后加入底物显色，用酶标仪测定吸光度，根据吸光度值得出试样中糖皮质激素的含量。	7 种：地塞米松、泼尼松龙、氟地塞米松、异氟泼尼龙、倍他米松、去炎松、氟米龙
10	GB/T 40145-2021 化妆品中地索奈德等十一种糖皮质激素的测定液相色谱/串联质谱法	精油类化妆品用正己烷分散，70%乙腈水溶液提取，水剂、乳液、膏霜类化妆品用乙腈提取，液相色谱-串联质谱仪测定。	7 种：地索奈德、16α-羟基泼尼松龙、16α-羟基泼尼松龙醋酸酯、二氟拉松、氟轻松、去羟米松、帕拉米松醋酸酯、地索奈德-21-醋酸酯、甲基泼尼松龙醋酸丙酸酯、卤倍他索丙酸酯、倍他米松丁酸丙酸脂

对以上标准方法的前处理进行对比发现，动物源性食品主要采用乙酸乙酯提取+固相萃取净化方式，化妆品主要用正己烷分散、乙腈提取——可能的原因是动物源食品基质大多含水量较低，加入乙腈后容易产生结块，所以用乙酸乙酯提取效果更好。由于糖皮质激素具有相似的分子结构和化学性质，像可的松和泼尼松龙、倍他米松和地塞米松、曲安奈德和倍他米松/地塞米松醋酸酯都是同分异构体，具有相同的离子对信息，必须通过色谱分离才能加以区分，因此建立分析方法时一定要优化好梯度洗脱程序，使同分异构体具有良好的分离度，否则可能会导致定性错误。糖皮质激素受样品基质影响大，定量时尽量选择基质标。