β-受体激动剂类药物检测国内标准比较解读

hujiangtao

2023/10/31
鹤壁农检联合队

私聊

兽药/抗生素检测

β-受体激动剂一类苯乙醇胺类药物，主要用于防治人/动物支气管哮喘、痉挛等病症。动物实验表明，β-受体激动剂具有营养再分配作用，可以显著提高酮体瘦肉率，被一些不法分子非法用于动物饲养中。长期食用含有β-受体激动剂残留的动物产品会出现毒副作用，危害人体健康，因此我国明令禁止在畜牧养殖过程中使用该类药物，国家也制定了一系列饲料、动物尿液/可食组织中β-受体激动剂残留检测方法标准，主要包括液相色谱-串联质谱法和气相色谱-质谱法，现将国内相关主要检测标准总结如下：

序号	标准名称	检测原理	药物数量、种类
1	农业部1063号公告-3-2008 动物尿液中11种β-受体激动剂的检测液相色谱-串联质谱法	试样经氢氧化钠溶液调节pH，叔丁醇-叔丁基甲醚混合溶液萃取并浓缩后用混合型阳离子交换固相萃取小柱净化，洗脱浓缩后用0.2%甲酸水溶液溶解，供液相色谱-串联质谱法进行检测，内标法定量。	11种：克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特步他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、班布特罗
2	农业部1063号公告-6-2008 饲料中13种β-受体激动剂的检测液相色谱-串联质谱法	饲料经盐酸-甲醇混合溶液提取，乙酸铅沉淀蛋白后用混合型阳离子交换固相萃取小柱净化，洗脱液蒸干后用0.2%甲酸水溶液溶解，供液相色谱-串联质谱法进行检测，外标法定量。	13种：克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、克仑普罗、班布特罗、妥布特罗
3	农业部1063号公告-7-2008 饲料中8种β-受体激动剂的检测气相色谱-质谱法	试样经乙酸钠缓冲溶液提取，提取液过混合型阳离子交换固相萃取小柱净化，吹干，经BSTFA+TMCS（99+1）衍生后，直接在气相色谱-质谱联用仪上测定。	8种：氯丙那林、马布特罗、特步他林、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、齐帕特罗、班布特罗、莱克多巴胺
4	农业部1031号公告-3-2008 猪肝和猪尿中β-受体激动剂残留检测气相色谱-质谱法	样品中呈结合态的β-受体激动剂类药物在乙酸铵缓冲溶液中经酶解后成游离状态，调节提取液pH，然后用乙酸乙酯和异丙醇混合溶剂萃取，萃取液旋转蒸干后用乙酸铵缓冲溶液溶解，过阳离子交换柱净化，氮气吹干后用BSTFA衍生，采用选择离子模式气相色谱质谱分析，内标法定量。	5种：马布特罗、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、班布特罗、莱克多巴胺
5	农业部1025号公告-11-2008 猪尿中β-受体激动剂多残留检测液相色谱-串联质谱法	试样中的β-受体激动剂残留物经酶解，离心后将上清液调pH，用异丙醇-乙酸乙酯提取，再用MCX柱子净化，吹干浓缩后用高效液相色谱-串联质谱法测定，同位素内标法定量。	4种：克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和西马特罗
6	农业部1025号公告-18-2008 动物源性食品中β-受体激动剂残留检测液相色谱-串联质谱法	试料中的残留药物经酶解，用高氯酸调pH后高速离心沉淀蛋白，上清液调pH后分别用乙酸乙酯和叔丁基甲醚提取，再用MCX固相萃取柱净化，液相色谱-串联质谱法测定。	9种：特布他林、西马特罗、沙丁胺醇、非诺特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克伦特罗、妥布特罗和喷布特罗
7	农业部1629号公告－1-2011 饲料中16种β-受体激动剂的测定液相色谱-串联质谱法	饲料经盐酸甲醇混合溶液提取，乙酸铅沉淀蛋白后经混合型阳离子交换固相萃取小柱净化，洗脱液蒸干后用0.1%甲酸水溶液溶解，供液相色谱-串联质谱仪进行检测，添加标准曲线法定量。	16种：克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、克仑普罗、班布特罗、妥布特罗、利托君、马贲特罗、喷布特罗
8	NY/T 3144-2017 饲料原料血液制品中18种β-受体激动剂的测定液相色谱-串联质谱法	饲料原料血液制品经酶解处理后，用混合型阳离子固相萃取小柱净化，吹干，稀释液溶解，液相色谱-串联质谱仪检测，基质添加校正、外标法定量。	18 种：克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、克仑普罗、班布特罗、妥布特罗、利托君、沙美特罗、克仑塞罗、福莫特罗、苯乙醇胺
9	NY/T 3145-2017 饲料中22种β-受体激动剂的测定液相色谱-串联质谱法	饲料样品经提取液提取后，用混合型阳离子固相萃取小柱净化，吹干，稀释液溶解，液相色谱-串联质谱仪检测，基质添加校正、外标法定量。	22 种：克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、克仑普罗、班布特罗、妥布特罗、利托君、沙美特罗、喷布特罗、马喷特罗、福莫特罗、苯乙醇胺、异克舒令、克仑塞罗
10	GB 31658.22-2022 食品安全国家标准动物性食品中β－受体激动剂残留量的测定液相色谱-串联质谱法	试料中残留的β-受体激动剂经酶解，高氯酸沉淀蛋白后，经乙酸乙酯、叔丁基甲醚萃取，混合型阳离子固相萃取小柱净化，液相色谱-串联质谱法测定，内标法定量。	18 种：克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、班布特罗、克仑丙罗、妥布特罗、利托君、克仑赛罗、马喷特罗、克仑潘特和羟甲基克仑特罗

从以上标准可以看出，动物源组织、血液、尿液等试样一般都需要先用盐酸葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶酶解，然后才能进行后续提取操作，这是因为β-受体激动剂可分为苯胺型（克伦特罗、西马特罗等）、苯酚型（沙丁胺醇等）、间苯酚二型（特布他林、莱克多巴胺、非诺特罗等），其中苯酚型在动物体内代谢时会在葡萄糖醛苷、硫酸酯等作用下发生各种共轭反应，且这些共轭物比较稳定，因此在试样提取前通过酶解反应来破坏这种结构，使结合态目标物解离出来。若饲料中添加β-受体激动剂则这些物质都呈游离态，所以不用酶解直接提取即可。提取前调节pH呈碱性（9-10）是为了让目标物大多呈分子游离态，有利于有机试剂提取，旋蒸后加入酸水溶液是为了让目标物成正离子便于MCX净化。β-受体激动剂在液质联用仪上灵敏度都非常高，是该类物质痕量残留检测的首选方法。