仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

求组:如何利用前处理把PBS样品中的盐去掉。

  • Ins_66e96167
    2024/06/19
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 求组!求组!求组!我要检测的样品是PBS样品,流动相为100%甲醇,我原本的前处理是100μL的PBS加300μL的乙腈去沉淀,然后吸取全部上清液进行氮吹,最后用400μL的甲醇复溶氮吹后的样品,最后过0.22的膜进行上机检测。但是这样子上机检测,样品中的盐并没有完全去掉,进而导致仪器压力不断上升,堵塞仪器。
    然后我发现一个性质,我采用100μL的PBS溶液,加入300、400、500、600、700、800、900μL的甲醇去沉淀,发现中间的500μL甲醇以及600μL甲醇沉淀过后,是整个环境是呈现混浊液体,其他300、400、700、800、900μL甲醇沉淀过后,液体环境并没有很混浊,因为甲醇中也是可以溶解一定量的盐的。
    最后,我采用了过小柱的方法进行盐除去,发现重复性并不良好。
    我的PBS配置方法(14.11g磷酸氢二钾、2.59g磷酸二氢钾、1.99g氯化钠定容于1L超纯水中)
    希望大家能帮我想想办法,解决问题,谢谢大家
    +关注 私聊
  • 液相色谱柱修复

    第1楼2024/06/20

    赛默飞的脱盐柱了解一下

0
    +关注 私聊
  • 通标小菜鸟

    第2楼2024/06/20

    应助达人

    如果样品中含有盐,可以采取以下方法进行处理:
    1.脱盐处理:
    使用脱盐柱(如PD-10脱盐柱)或者脱盐离心管(如Zeba Spin脱盐柱)将样品中的盐去除。这些方法通过凝胶过滤将大分子蛋白与小分子盐离子分离,从而达到去除盐的目的。
    2.沉淀法:
    使用酒精沉淀、氯仿甲醇沉淀等方法将蛋白沉淀下来,然后用去离子水或者盐浓度较低的缓冲液重悬。这可以在一定程度上降低样品中的盐含量。
    3.逆相色谱法:
    采用高效液相色谱(HPLC)进行蛋白的分离与纯化。逆相色谱法可以有效地去除样品中的盐分,并对蛋白进行纯化。这种方法适用于具有高度选择性和分辨率要求的样品处理。
    4.离子交换色谱法:
    通过离子交换色谱法,可以利用蛋白与离子交换树脂间的静电作用来分离蛋白和盐。这种方法既可以降低样品中的盐含量,也可以对蛋白进行纯化。
    5.拔针法:
    在质谱前处理过程中,可以采用拔针法(ZipTip)对样品进行去盐。拔针法是一种便捷、快速的微量样品处理方法,通过小型逆相色谱柱进行去盐和浓缩。

0
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...