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  • we-july

    第12楼2008/05/27

    如viscotektegent所说,应该是你的缓冲盐在70%的甲醇水中析出导致柱压反常,用高比例的水相比如20:80乙腈或甲醇-水小流速长时间冲洗,把析出的盐冲出来就好了。
    凝胶柱可以用低比例的有机相冲洗,没有问题。

    冲后基线下滑估计是还没有平衡好,里面析出的盐还没有完全冲净,又在你的流动相中溶解了,导致流动相变化。

    viscotektegent 发表:水相体系吧?
    只有多冲洗一段时间再说了,应该不会有太大问题。
    如果泵压持续上升,那么有可能是系统中哪里堵了。就比较麻烦了,但是也不难:分段找堵塞的地方,如:进样阀、传输管、过滤膜等等。比较繁琐。
    或者在流动相中加些稍强些的酸,再冲洗一段时间再说。没准儿会把堵住的地方冲干净。再不行就换成有机相,继续冲洗。因为有可能别人在甲醇体系中的样品等不溶解在水中,所以造成堵塞,并引起泵压升高。

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  • nannan231

    第13楼2008/05/27

    但是现在用纯水做流动相,进标样,出峰时间都是一样的,是不是柱子失效了?有没有专门测柱效的地方?
    柱子怎么会突然失效的?没有什么违规操作

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  • 雪妖

    第14楼2008/05/27

    测定柱效自己也可以测定的,你按色谱柱出厂的那个色谱条件做。

    nannan231 发表:但是现在用纯水做流动相,进标样,出峰时间都是一样的,是不是柱子失效了?有没有专门测柱效的地方?
    柱子怎么会突然失效的?没有什么违规操作

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  • nannan231

    第15楼2008/05/28

    是不是只要标线能做出两个九,就说明柱子是没有问题的?

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  • 草根

    第16楼2008/05/28

    没什么问题,慢慢洗吧,能做就做着

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  • we-july

    第17楼2008/05/29

    标线至少3个9才可以用,2个9太不好了。
    不过柱子柱效如何不是看你的标线,这个要根据你柱子的说明书附的柱效实验来作。

    nannan231 发表:是不是只要标线能做出两个九,就说明柱子是没有问题的?

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  • nannan231

    第18楼2008/05/29

    可是柱子刚买回来的时候做的标线是两个九,是不是柱子买回来就不好呢?

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  • we-july

    第19楼2008/05/30

    不排除这个可能,但是最有可能是你标样的问题,或检测方法的问题。一般来说只有到了3个9才可以符合要求。

    另外标准曲线拟合方式也影响到r值的。

    不知道你的标样是一个还是几个的混合标?几阶拟合?

    nannan231 发表:可是柱子刚买回来的时候做的标线是两个九,是不是柱子买回来就不好呢?

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  • nannan231

    第20楼2008/05/30

    我用的标样是分开进的,进的四种物质,用的一阶拟合,用二阶拟合是可以打到三个九的。
    另外,是不是一直拿纯水洗柱子也不是太好呢?柱子的说明书上那纯水做的流动相。

    we-july 发表:不排除这个可能,但是最有可能是你标样的问题,或检测方法的问题。一般来说只有到了3个9才可以符合要求。

    另外标准曲线拟合方式也影响到r值的。

    不知道你的标样是一个还是几个的混合标?几阶拟合?

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