大家也帮忙看一下
这是我做图的条件：
1、色谱柱：岛津C18分析柱 ， 4.6mm ′ 250 mm 流动相A ：0.1mol/L CH3COONa(用冰醋酸调pH 6.5)/乙腈=93/7
流动相B ：乙睛/水＝4/1
流速:1ml/min；检测波长：254nm；柱温：38℃；进样体积：20mL
3、样品配制：取18氨基酸供试品1ml加水至100ml，对照品：取对照品适量加0。1mol/l盐酸溶解即得。
2、样品的衍生
精密量取氨基酸对照品溶液和供试品溶液200mL，置一1mL离心管中，加入1mol/L三乙胺乙腈溶液100mL，加入0.1 mol/L 异硫氰酸苯酯（PITC）乙腈溶液100mL ，混匀，室温放置1小时,加入400mL正己烷，振摇，放置10分钟，取下层溶液，用0.45mm滤器过滤。
梯度：
时间 B%
13 7
23 23
29 35
35 40
37 100
42 100
42.01 0

邮件已发送，岛津柱子也可以做的，我试过，效果不错，流动相的PH不用调，你可以试试我的方法

感谢！
我试下有了结果告诉你！

异硫氰酸苯酯衍生法氨基酸的测定
条件 波长 254nm 流速1ml/min 柱温 36度
梯度控制表
时间    A%    B%
0    100    0
5    95    5
13    95    5
14    93    7
20    88    12
25    77    23
35    67    33
38    25    75
40    25    75
40.1    0    100
45    0    100
46    100    0
60    100    0


A：0.1mol/l醋酸盐缓冲溶液（Ph6.5）：乙腈=97：3
（醋酸钠用醋酸调PH）
B：乙腈：水=4：1
柱温36度 K-C18 250

我的色谱条件跟上面这位差不多呀！
只是梯度有差异，不同的色谱系统适有差异。
现在找不到好的解决方案，真是完完了哟！！！

不要着急，静下心来仔细考虑一下，很多问题都在细节上
如果时间来来得及，你可以自己逐一摸索条件

我用的是WATERS的仪器，软件是大连依利特,柱子是PICO-TAG（300*3.9mm）；
梯度：A，0.14mol/l醋酸铵（6%乙腈）溶液；B，60%乙腈；柱温，46℃；波长，UV 254nm；
时间 流量（ml/min） 泵A% 泵B% 形状
0.000 1.00 100 0 0.5
1.000 1.00 100 0 0.5
21.00 1.00 54 46 0.4
21.50 1.00 0 100 0.5
22.00 1.50 0 100 0.5
26.00 1.50 0 100 0.5
26.50 1.50 100 0 0.5
39.00 1.50 100 0 0.5
39.50 1.00 100 0 0.5
与大家一起分享把。PITC要用新开封的，每次进样要让所有的情况最好保持一致，重复性会相当不错。

这是个很麻烦的问题，PITC衍生，走柱子分析得很好的话比较困难

十八种要每个峰都出来，而且峰漂亮是不太容易呀
且不说重线性、精密度了，慢慢来了
能建立这方法说明就能做出来，
在努力！！！！

请问在哪儿购买异硫氰酸酯衍生试剂啊！能告诉我一份具体的操作步骤吗？