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  • chengjingbao

    第11楼2008/08/22

    HPLC我没用过,原来与气相理论差别挺大的,谢谢你的解释。有一点我有疑问,用液相,怎么会用波谱技术,这应该属于联用范畴吧。它用的是什么类型的光谱呢?

    sunlitj 发表:6. 在一般的色谱分析中都要分析色谱峰的纯度吗?
    这个不是一般的色谱分析,强制降解试验,就是找一个合适的条件使样品分解,然后通过DAD检测器,做三维图谱,看每一个峰在相应的波长处是单峰还是几个峰,这个应该是HPLC分析方法验证的一项内容。我们在做方法验证,有这样的分析,但是我也不是特别清楚。

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    第12楼2008/08/22

    如果HPLC配的检测器是DAD的,那么工作站中都有相关纯度角的部分。
    1和2一起说
    这个概念是PDA(DAD)检测器中的,以峰顶处的光谱为标准,软件自动比较其与色谱峰上每个采样点的光谱之间的差异,比较的结果以纯度角表示,如果纯度角(Purity Angle)超过阈值角(Peak Threshold),则表明有未分离的峰存在(也就是说,即使此峰对称性很好,但是它并不指向一个组分,而是包裹有杂质,即此峰含共流出物)。这只是根据DAD检测器的数据,大致给我们一个判断峰纯度的方法,一般这样认为:纯度角<纯度阈值,峰纯的可能性大;纯度角>纯度阈值,峰肯定不纯。
    纯度角=基线角-顶点角(如果从这个式子看,出现负值应属正常);
    阈值=溶剂角+噪音角。
    关于这个概念只知道这么多了,因为涉及到工作站中的数据处理,无能为力,只知道表面的东西,呵呵……
    3、我认为应该是杂质峰的面积百分比。
    4. 表2中好像是专属性试验吧,看在酸水解、碱水解等条件下,主成分会不会变质、产生什么杂质。查了一下Homogeneous是同族的意思,在这里具体指什么也不好说。
    共同洗脱:两个或多个组分同时流出色谱柱,在色谱图上显示为一个峰,其实为多个组分。
    5、这个问题见1和2。
    6、有条件当然是分析一下好啊,这样才能保证杂质或主成分对应的峰中没有包裹共流出物,一些合成或者天然产物中,杂质和主成分性质很相似,相互之间分开不容易,分离度是在能明确看到两个峰的时候才可以计算的,但是如果一个包裹在另一个中,我们就无能为力了。

    这个帖子处分暴露了我说话罗嗦的毛病,不过还是希望罗嗦了这么多,能多少对你有帮助

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  • happyjyl

    第13楼2008/08/22

    非常感谢!

    yangz 发表:这是色谱分析中用到的一个参数,指的是所分离的色谱峰的纯度即此峰是单一成分还是混有其他成分,因为色谱就是一个分离净化过程,峰不纯则没有达到目的。计算纯度必须用到DAD检测器普通的VWD是不成的,其计算是基于DAD检测器所接收的光谱信号,具体的这里不好介绍要看一看DAD的说明了

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  • happyjyl

    第14楼2008/08/22

    非常感谢!这的确是HPLC分析方法验证中的内容。是不是只有杂质分析中才会用到呢?

    sunlitj 发表:6. 在一般的色谱分析中都要分析色谱峰的纯度吗?
    这个不是一般的色谱分析,强制降解试验,就是找一个合适的条件使样品分解,然后通过DAD检测器,做三维图谱,看每一个峰在相应的波长处是单峰还是几个峰,这个应该是HPLC分析方法验证的一项内容。我们在做方法验证,有这样的分析,但是我也不是特别清楚。

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  • happyjyl

    第15楼2008/08/22

    非常感谢!你的回帖很有帮助!我在本论坛HPLC版看到过一个帖子,是关于峰纯度分析的,看得我头昏脑涨,感觉没你说得清楚。因为他没说是三维图谱,所以我一直很疑惑是怎么比较的。
    http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20070522/847463/

    又在别处看到另一个帖子:
    http://www.sepu.net/dvbbs/dv_rss.asp?s=xhtml&boardid=176&id=104695&page=2

    里面说“就我目前所知,只有Waters的才有纯度角和阈值的概念,Agilent的有这个功能,但是说法不一样的。至于纯度角的计算,只要你在Waters 2996上采集了三维的数据,处理以后,就会有纯度角和阈值了,仪器会自动计算的。”--不知道是这样吗?

    baihezll 发表:如果HPLC配的检测器是DAD的,那么工作站中都有相关纯度角的部分。
    1和2一起说
    这个概念是PDA(DAD)检测器中的,以峰顶处的光谱为标准,软件自动比较其与色谱峰上每个采样点的光谱之间的差异,比较的结果以纯度角表示,如果纯度角(Purity Angle)超过阈值角(Peak Threshold),则表明有未分离的峰存在(也就是说,即使此峰对称性很好,但是它并不指向一个组分,而是包裹有杂质,即此峰含共流出物)。这只是根据DAD检测器的数据,大致给我们一个判断峰纯度的方法,一般这样认为:纯度角<纯度阈值,峰纯的可能性大;纯度角>纯度阈值,峰肯定不纯。
    纯度角=基线角-顶点角(如果从这个式子看,出现负值应属正常);
    阈值=溶剂角+噪音角。
    关于这个概念只知道这么多了,因为涉及到工作站中的数据处理,无能为力,只知道表面的东西,呵呵……
    3、我认为应该是杂质峰的面积百分比。
    4. 表2中好像是专属性试验吧,看在酸水解、碱水解等条件下,主成分会不会变质、产生什么杂质。查了一下Homogeneous是同族的意思,在这里具体指什么也不好说。
    共同洗脱:两个或多个组分同时流出色谱柱,在色谱图上显示为一个峰,其实为多个组分。
    5、这个问题见1和2。
    6、有条件当然是分析一下好啊,这样才能保证杂质或主成分对应的峰中没有包裹共流出物,一些合成或者天然产物中,杂质和主成分性质很相似,相互之间分开不容易,分离度是在能明确看到两个峰的时候才可以计算的,但是如果一个包裹在另一个中,我们就无能为力了。

    这个帖子处分暴露了我说话罗嗦的毛病,不过还是希望罗嗦了这么多,能多少对你有帮助

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    第16楼2008/08/22

    总体上来说,只要是DAD检测器,相应的工作站中(各厂家正版工作站)都有查看峰纯度的功能,但是具体叫法或参数不同。

    如果针对纯度角的概念,可以说只有Waters有这个概念,我以上所说也是根据Waters来的,数据采集的时候选择三维采集模式,建立数据处理方法时设置好相关参数,在结果中就可以查看每个峰的纯度角和纯度阈值,通过两个数值的比较来判断峰的纯度。一般在方法建立初期或者方法验证的时候,有条件都会看一下,以保证每个峰对应的为一个组分,这样方法才能更加可信。

    happyjyl 发表:至于纯度角的计算,只要你在Waters 2996上采集了三维的数据,处理以后,就会有纯度角和阈值了,仪器会自动计算的。”--不知道是这样吗?

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  • ta2582391

    第17楼2008/08/22

    色谱峰分析中的样品纯度不是指实际含量,它主要是指检测器有吸收的杂质含量多少(有的指标要求主成分),一般用面积归一法就行了。因此在色谱分析中纯度高并不意味含量就高

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  • 有水有渝

    第18楼2008/08/22

    应助达人

    纯度反应一个物质质量的高低,含量和杂质水平都是纯度的反映,含量高,杂质少说明产品的质量好.

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  • ralfarnold

    第19楼2008/08/25

    这是色谱分析中用到的一个参数,指的是所分离的色谱峰的纯度即此峰是单一成分还是混有其他成分,因为色谱就是一个分离净化过程,峰不纯则没有达到目的。计算纯度必须用到DAD检测器普通的VWD是不成的,其计算是基于DAD检测器所接收的光谱信号,具体的这里不好介绍要看一看DAD的说明了

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  • iceman888

    第20楼2008/08/25

    正解,dad可以直接报告峰的纯度

    sunlitj 发表:这是色谱分析中用到的一个参数,指的是所分离的色谱峰的纯度即此峰是单一成分还是混有其他成分,因为色谱就是一个分离净化过程,峰不纯则没有达到目的。计算纯度必须用到DAD检测器普通的VWD是不成的,其计算是基于DAD检测器所接收的光谱信号,具体的这里不好介绍要看一看DAD的说明了

    四楼的解释是正确的。

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