1基线波动太大，是否是系统污染，或灯能量太低，柱子平衡时间不够造成。
2分析时间太长，建议加大梯度洗脱。
3主峰2分离不佳，可在水相加入TFA或TEA试试。
4换一根柱子试试，可能有很大改善。

1.从20-40min的梯度没有必要，可从0-20min的甲醇5%-40%走一下看一看；
2.若作含量可不管其它的峰，梯度可以走快点。

1、先说基线漂移的问题，因为甲醇的吸收和水的吸收不同，在相对低的波长处剃度洗脱的基线肯定是漂移的。或者波长300以上，或者换成乙腈。
2、对峰定量的前提是有良好的分离度，这要考虑的问题就多了。检测波长对该组分是否是最佳波长？该组分的性质决定分离的条件。剃度洗脱不是最终的解决办法，。洗脱时产生的假峰应该考虑，

其实，不用梯度也能做。

减小漂移请选用梯度级试剂,峰型不好请改变色谱条件或者更换色谱柱

貌似峰都有些拖尾，也许用别的酸，或者调pH能有改善。也可能是预柱脏了。

本图作为指纹图谱：死时间处的峰太大了，应该：
1.初始流动相的有机相比例从零开始，看是不是还有杂质没显现；
2.40~50min之间没有杂质峰，梯度平台没必要。
3.设置0~50min，有机相0-40%，最50-60min用初始的流动相比例平衡
含量测定
25% 有机相即可。

1.要看6-12min这间的峰有没有分析意义,再就是需定量的两峰之间分离得不是很好,如果加以改善,我想基线也会平稳起来
2.可以试试:0min,5%甲醇；20min，15%甲醇；25min，15%甲醇；35min，25%甲醇；45min，40%甲醇；50min，40%甲醇；55min，15%甲醇

看起来峰1附近基线较差，杂峰较多，不利于定量；峰2包含了一个小峰没有分离出来，不能准确定量，2处都应对梯度进行调整。
如果对其他的峰没有什么要求的话，可缩短分析时间。

首先要说的是你的这张图谱做的真的不敢恭维！好的指纹图谱是几乎每个峰都能基线分离的，大部分能定量，也叫定量指纹图谱。

看你的谱图你使用的仪器应该是岛津或者Agilent，岛津的可能性要大些，关键的问题以下有几个：
1、你的样品前处理有问题，溶剂噪音很大，最好改用流动相最初始比例的溶剂溶解，这样会消除2 min的溶剂峰
2、看你的色谱图和流动相，你使用的高效液相色谱仪检测器不适合这个样品指纹图谱分析，中药复杂成分的指纹图谱最好使用Waters的2996DAD检测器，含1024光电倍增管，而你使用的Agilent或是岛津的DAD对复杂成分紫外可见响应值有问题（我自己多次遇到这样的问题，最后对比上述三家公司仪器得出的结论），建议最好使用Watersd的2996DAD检测器。这样建议的；理由是该检测器在Empower工作站里很方便查看各色谱峰的紫外吸收，从而为指纹图谱的波长选择留下很大余地，换可以选择二维指纹图谱。
3、该色谱柱不适合该样品的指纹图谱，试试Agilent或luna的柱子
4、如楼上各家所见，有机流动相建议使用乙腈，背景噪音会小很多
5、流动相条件太复杂，考虑到重复性等，差不多2-4步梯度变化就可以了

注意了以上的这些后，再对各色谱峰进行流动相的梯度优化，然后就要靠经验了，需要的话可以联系我QQ332806956 niaimin215@163.com

03yx2 发表:大家图谱来找茬(第二季)
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要求:1.找出图谱中存在的问题(越多越好噢!)
2.图谱中一个主要问题是基线漂移(在图谱两端基线很平,中间峰却漂移的很大,最小漂移为50左右,最大的有150).
针对峰的漂移你有什么好的建议嘛?
3.如果要对图中的两个峰(图谱中峰1、峰2)进行含量测定,你觉得应该怎样改善条件才可以更好的进行定量分析.
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目的：研究某一个厂家注射液的指纹图谱。
色谱条件为:Eclipse XDB-C18（ODS-2，250×4.6 mm，5 μm）,甲醇-5％乙酸梯度洗脱,温度:25℃,检测波长:284nm;流速1.0ml/min.进样量:10ul.
检测样品：某厂复方注射剂.
梯度表如下：

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图谱如下: