甾醇的沸点较高，将甾醇进行乙酰化或硅烷化等衍生化处理的原因，就是为了降低分析时的汽化温度和柱温。如果采用非衍生化处理直接进样的毛细管，就必须选择耐高温，低流失的毛细管柱。国标中测定甾醇采用甲酰胺作为酰化试剂。具体操作：
1酰化：溶解约10mg甾醇的毛地黄皂苷化物于0.5ml甲酰胺和二甲基甲酰胺混合物中，如有必要可加热。
2萃取：加入2.5ml正戊烷至冷却后的溶液中，盖盖后摇荡使之分层。使用清净的顶部戊烷层，其中含有释放出的甾醇，进行色谱分析。此溶液每ml约含1mg甾醇。

应助达人

浓度高的样品如何？

你加大进样的浓度看看有没有出峰？也有可能是灵敏度低没有检测到。还有就是你仪器衰减是否合适？

仪器衰减用了各种档的都没有样品
温度升高了也没有样品峰
如果是色谱条件的问题那为什么在进口仪器上能检测，在国产仪器上就不能检测呢，也用过进样口检测器310°，柱温260°的都没有峰
如果是柱流速太快在色谱柱上没有保留，那我把柱流速降低了也没有峰
大家帮我想想吧

既然条件都一致就要考虑故障机器上柱子的问题了。

你装柱子装好了吗？进样垫会不会漏气啊？

色谱柱都是一模一样的，现在换回去也是一样的出峰，再看看

我认为是你分析的样品没有经过处理，因而没气化，所以不出峰。

换一下仪器条件吧！

不是吧，条件也是一样的，虽然说国产仪器没有进口的好，也不能到这样的地步吧，我把进样口和检测器温度加高，出峰了，现在又换回265°再看看，
怎么就那么大差距呢