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  • plexu

    第11楼2009/12/10

    顺便把翻译也贴一下:

    神话四:提高温度往往有利于分离效果

    错误! 随着温度升高,流动相粘度下降,分析物传质速率因此提高,色谱分离效果会变得更好。这是对的,但是除了柱效,温度同样影响保留因子(k)和选择性(α)。温度的变化既能够提高分辨率(其实这也是色谱分析最关心的问题),有时也会使分辨率下降。保留时间往往随着温度升高而降低,因为温度作为一个热力学参数,在较高温度下,分析物倾向于留在流动相中,分析物会更快的从柱子上被洗脱下来。然而,不同的化合物保留时间随温度变化会有不同的响应程度。更加确切的说,它们的范德霍夫线的斜率不同(ln k与1/T,T以绝对温度计量);换句话说,温度变化,化合物之间的选择性α值会发生改变。另外温度增加会使低k值的色谱峰出峰更快,甚至接近在无保留物质出峰时间t0附近出来,导致很难进行定量分析。
    以镇痛药的分析为例,图二显示的一系列的色谱图列出了七种镇痛药在柱温20-90°C的分离情况变化。我们从中可以发现许多特点。首先,所有分析物随着温度升高,保留时间变短且峰变窄,意味温度升高利于分离效果。其次,镇痛药之一的水杨酸(即阿司匹林),在峰5和峰6之间,随着温度变化位置改变较大。事实是,在20-40°C时,该物质随温度变化,洗脱顺序也发生了变化。在中间的30℃时,水杨酸和第6号峰的非那西丁一起出峰。在这个实例中,温度大于40°C,导致了分离时间变短和洗脱顺序发生变化。
    当然,一个提高温度的好处在于降低了操作时的柱压,以便于使用更大的流速和粒径更小的填料。另一个在高温下能够导致色谱柱性能问题的因素是流动相的温差。如果柱子在60°C下操作,但是流动相在室温流入,那么进入的较冷的流动相就能够引起峰变形,原因是不同温度下分析物会趋向在高温的流动相中。所以建议大家在较高温度下使用色谱柱的时一定记得预热流动相。

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  • 雪在烧

    第12楼2009/12/10

    如果别的条件都不改变的情况下,升高柱温,保留时间肯定缩短了,我做的一直是这样。

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  • 1234chen

    第13楼2009/12/10

    所以我不明白楼主说的异常,指的是什么?

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  • yajun50288

    第14楼2009/12/10

    有影响,但对结果影响不大

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  • 雪妖

    第15楼2009/12/10

    pluex说得很好哟,内容很全,
    柱温太高,也不利于系统的稳定,重复性会较差,
    柱温和室温相差不大的时候,重复性比较好
    一般柱温升高,保留时间缩短,
    不过以前也做到过柱温改变,出峰顺序改变的

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  • zxhcnf

    第16楼2009/12/10

    学习了,谢谢plexu的翻译呵呵。。。

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  • 小卢

    第17楼2009/12/11

    我就遇到了这种情况,也就是我说的异常。在升高柱温后,保留时间反而延长了。还请大家给点提示!

    pheui(pheui) 发表:一般情况下,柱温升高,保留时间变短。但是我在论坛上见过有人说,温度升高,保留时间变长:是用四元泵需要二(三)相溶剂混合的时候,发现当室温突然变化,由于四元泵的溶剂部分都没有保温,引起溶剂密度的变化,进而引起实际的溶剂配比发生变化。不过这个没有亲自验证过……还请达人指教!!

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  • 小卢

    第18楼2009/12/11

    十分感谢,受教了,要好好研究研究啊!

    plexu(plexu) 发表:顺便把翻译也贴一下:

    神话四:提高温度往往有利于分离效果

    错误! 随着温度升高,流动相粘度下降,分析物传质速率因此提高,色谱分离效果会变得更好。这是对的,但是除了柱效,温度同样影响保留因子(k)和选择性(α)。温度的变化既能够提高分辨率(其实这也是色谱分析最关心的问题),有时也会使分辨率下降。保留时间往往随着温度升高而降低,因为温度作为一个热力学参数,在较高温度下,分析物倾向于留在流动相中,分析物会更快的从柱子上被洗脱下来。然而,不同的化合物保留时间随温度变化会有不同的响应程度。更加确切的说,它们的范德霍夫线的斜率不同(ln k与1/T,T以绝对温度计量);换句话说,温度变化,化合物之间的选择性α值会发生改变。另外温度增加会使低k值的色谱峰出峰更快,甚至接近在无保留物质出峰时间t0附近出来,导致很难进行定量分析。
    以镇痛药的分析为例,图二显示的一系列的色谱图列出了七种镇痛药在柱温20-90°C的分离情况变化。我们从中可以发现许多特点。首先,所有分析物随着温度升高,保留时间变短且峰变窄,意味温度升高利于分离效果。其次,镇痛药之一的水杨酸(即阿司匹林),在峰5和峰6之间,随着温度变化位置改变较大。事实是,在20-40°C时,该物质随温度变化,洗脱顺序也发生了变化。在中间的30℃时,水杨酸和第6号峰的非那西丁一起出峰。在这个实例中,温度大于40°C,导致了分离时间变短和洗脱顺序发生变化。
    当然,一个提高温度的好处在于降低了操作时的柱压,以便于使用更大的流速和粒径更小的填料。另一个在高温下能够导致色谱柱性能问题的因素是流动相的温差。如果柱子在60°C下操作,但是流动相在室温流入,那么进入的较冷的流动相就能够引起峰变形,原因是不同温度下分析物会趋向在高温的流动相中。所以建议大家在较高温度下使用色谱柱的时一定记得预热流动相。

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  • 雪妖

    第19楼2009/12/11

    没有用过四元的,温度升高,会不会是使有机相挥发了,保留时间变长了
    只是瞎猜的

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  • 小卢

    第20楼2009/12/12

    这个可能行有,我也想到过。但是进入色谱柱后就是挥发能挥发到哪里去呢?所以我认为这个观点站不住!

    雪妖(czj_1027) 发表:没有用过四元的,温度升高,会不会是使有机相挥发了,保留时间变长了
    只是瞎猜的

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