plexu
第11楼2009/12/10
顺便把翻译也贴一下:
神话四:提高温度往往有利于分离效果
错误! 随着温度升高,流动相粘度下降,分析物传质速率因此提高,色谱分离效果会变得更好。这是对的,但是除了柱效,温度同样影响保留因子(k)和选择性(α)。温度的变化既能够提高分辨率(其实这也是色谱分析最关心的问题),有时也会使分辨率下降。保留时间往往随着温度升高而降低,因为温度作为一个热力学参数,在较高温度下,分析物倾向于留在流动相中,分析物会更快的从柱子上被洗脱下来。然而,不同的化合物保留时间随温度变化会有不同的响应程度。更加确切的说,它们的范德霍夫线的斜率不同(ln k与1/T,T以绝对温度计量);换句话说,温度变化,化合物之间的选择性α值会发生改变。另外温度增加会使低k值的色谱峰出峰更快,甚至接近在无保留物质出峰时间t0附近出来,导致很难进行定量分析。
以镇痛药的分析为例,图二显示的一系列的色谱图列出了七种镇痛药在柱温20-90°C的分离情况变化。我们从中可以发现许多特点。首先,所有分析物随着温度升高,保留时间变短且峰变窄,意味温度升高利于分离效果。其次,镇痛药之一的水杨酸(即阿司匹林),在峰5和峰6之间,随着温度变化位置改变较大。事实是,在20-40°C时,该物质随温度变化,洗脱顺序也发生了变化。在中间的30℃时,水杨酸和第6号峰的非那西丁一起出峰。在这个实例中,温度大于40°C,导致了分离时间变短和洗脱顺序发生变化。
当然,一个提高温度的好处在于降低了操作时的柱压,以便于使用更大的流速和粒径更小的填料。另一个在高温下能够导致色谱柱性能问题的因素是流动相的温差。如果柱子在60°C下操作,但是流动相在室温流入,那么进入的较冷的流动相就能够引起峰变形,原因是不同温度下分析物会趋向在高温的流动相中。所以建议大家在较高温度下使用色谱柱的时一定记得预热流动相。
小卢
第18楼2009/12/11
十分感谢,受教了,要好好研究研究啊!