怎么也不见楼主的回复，我们都期待找到出现问题的原因。

这个看起来像是柱子的问题，是不是柱子里塌陷了，用二氯甲烷/甲醇=96/4修复一下，看看怎么样。

hrcren(hrcren) 发表:我们最近做一个亚氨基化合物的分析（马来酸酐和一个伯胺形成的一个亚胺化合物），用的70/30（甲醇/水）的流动相，其中的水相用硼酸调pH（到多少忘了，有空查到了再补充），但跑出来的峰形却很怪，居然是双峰，两个峰的高度也不一定，有时一样高，有时不一样高，各种比例都有（见后图），不管是我们自己做出来的产品还是客户提供的合格产品（相当于标样），跑出来都是这个样子，搞不懂是什么原因，希望各位高手能够分析分析原因，讨论讨论




产品结构


产品液相图

热切等待楼主解决问题的结果呢。

感觉柱子的原因小一些，我觉得是不是有两种物质没分开？流动相跑个梯度看看还有没有双峰。

我也有此想法，不过这个方法是以前确定下来大家都认可的，现在时间紧赶产品也没有时间来细化，我只是有此一疑问，提出来供大家探讨罢了，他们也不着急和重视这个问题，因为他们现在都是直接把这两个峰直接加起来都算成产品的，含量可以到98.5%以上呢

为估计很有可能是这个原因，我以前曾做过一个吡啶类2-取代位置是-OK的一个化合物，其跑到液相上也是出双峰，分得还没有这个好，有时分得开，有时出两个包，连买回来的标样都是这样，后来配样的时候把pH调了一下，就好了

不做前处理，直接用流动相溶解稀释，进样

我觉得有两种可能，要么是样品不稳定产生异构，要么是流动相的酸性使部分样品酸化成了季铵盐，个人认为后一种的可能性更大一些，因为感觉这个样品还是蛮稳定的，产生异构的可能性不大

后来我们用甲醇直接稀释后直接进样就只有一个峰了，现在唯一担心的就是，用甲醇做稀释剂会不会因为甲醇与流动相（甲醇：水=70：30）的极性差异而产生溶剂效应，因为原来在用流动相溶解跟踪样的时候，会产生分层现象（跟踪样的反应体系是甲苯溶剂体系），用甲醇溶解，不会产生分层现象

现在做下来的结果，大概似乎好像maybe可能是用甲醇的结果要稍微好一些，因为甲醇把双峰变成了单峰，而且消除了分层现象，至于进到柱子里面以后甲苯还会不会与水分层，那个，我看不见，估计应该影响不大，因为做产品没有什么大的影响，做跟踪有丁点影响也看不出来，原来的跟踪样本来就经常出些乱七八糟的不规则的大包，梯形、馒头形，从头拉到尾的那种，积分的时候根本都不看的那种

嘿嘿，俺们的仪器古老了一点，没有梯度系统，抱歉，做不了了

好像是柱子的分离度不好了

没有说清楚