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  • 雪妖

    第12楼2010/02/23

    也不是吧,液相中参与分离的:样品,流动相,色谱柱的固定相

    也不能说谁主谁次呀,想想都觉得很重要呢

    eee9999eee(eee9999eee) 发表:色谱柱最关键,然后是流动相。

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  • zxhcnf

    第13楼2010/02/23

    支持plexu版主,选择性应该是最重要的,其次是方法。一个典型的例子是,手性分子拆分,如果用手性柱进行分离会比较简单,如果用C18的柱子来分可能会很难,但也不是不可能,比如在流动相中加入铜离子或B环糊精,也是常用于手性分子分离的方法。还有就是,极性很强的化合物如葡萄糖,用C18柱,哪怕你怎么调整方法都会很快就冲洗出来,但用氨基柱就很好分。

    plexu(plexu) 发表:这个问题有点复杂,选择性和柱效是决定分离度的两大主要因素。选择性是两个峰出峰时间的差异,差异越大选择性越好,分离度相应越好;柱效则是峰的宽窄,峰越窄柱效越高,分离度越好。
    选择性与柱子的固定相类型有关,也与流动相的pH和温度有关。而柱效就主要和填料粒度、粒径孔径的均匀性、键合度、装柱质量、色谱柱长度有关。
    流动相配比可以影响出峰时间,对分离度也有影响。

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  • 雪妖

    第14楼2010/02/28

    加入铜离子,记得加入过硫酸铜,用的是C18色谱柱,但是老板说硫酸铜有毒,我不明白是对人和还是对色谱柱
    对色谱柱有害吗?

    zxhcnf(zxhcnf) 发表:支持plexu版主,选择性应该是最重要的,其次是方法。一个典型的例子是,手性分子拆分,如果用手性柱进行分离会比较简单,如果用C18的柱子来分可能会很难,但也不是不可能,比如在流动相中加入铜离子或B环糊精,也是常用于手性分子分离的方法。还有就是,极性很强的化合物如葡萄糖,用C18柱,哪怕你怎么调整方法都会很快就冲洗出来,但用氨基柱就很好分。

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  • 可爱宝贝

    第15楼2010/02/28

    流动相比例,温度,色谱柱,包括检测波长都有影响

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  • zxhcnf

    第16楼2010/02/28

    你们老板说硫酸铜有毒应该是指对人的,我搜索了一下,也发现是对人有毒的,这个网址可以让您了解一点毒性的问题http://zhidao.baidu.com/question/130703210.html。对色谱柱有一定的影响,但如果您一直用来分析同一种化合物也没什么关系,只要尽量防止铜离子残留在柱内就好。如果还要用这根柱子分析其它的化合物可能就会有很大的影响,因为铜离子的残留会引起极性、碱性化合物的拖尾(由于铜离子与化合物的螯合作用),这就是为什么现代高效液相色谱柱要用超高纯硅胶基质的原因,目的就是消除因螯合作用而导致分析极性、碱性化合物时产生的拖尾。

    雪妖(czj_1027) 发表:加入铜离子,记得加入过硫酸铜,用的是C18色谱柱,但是老板说硫酸铜有毒,我不明白是对人和还是对色谱柱
    对色谱柱有害吗?

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  • 千山万水

    第17楼2010/02/28

    分离度是一个系统参数,我们得到的都是理论质,就想理论踏板数一样。各相关方如检测品种、浓度、流动相理化性质、流速、柱子类型等都应该有密不可分的关系。

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  • 雪妖

    第18楼2010/02/28

    哇塞,好怕怕哟,下次小心了,当时做的时候弄在手上也没有怎么冲洗,很不好的习惯

    因为是盐,每次用完都洗得很干净,有的时候干脆冲一个晚上的,低流速冲的

    zxhcnf(zxhcnf) 发表:你们老板说硫酸铜有毒应该是指对人的,我搜索了一下,也发现是对人有毒的,这个网址可以让您了解一点毒性的问题http://zhidao.baidu.com/question/130703210.html。对色谱柱有一定的影响,但如果您一直用来分析同一种化合物也没什么关系,只要尽量防止铜离子残留在柱内就好。如果还要用这根柱子分析其它的化合物可能就会有很大的影响,因为铜离子的残留会引起极性、碱性化合物的拖尾(由于铜离子与化合物的螯合作用),这就是为什么现代高效液相色谱柱要用超高纯硅胶基质的原因,目的就是消除因螯合作用而导致分析极性、碱性化合物时产生的拖尾。

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  • 快乐

    第19楼2010/04/12

    应助达人

    看来,是一个综合的整体,不是单一一个原因。

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  • 东风恶

    第20楼2010/04/13

    合理的分离机理,色谱条件的优化。

    快乐(ynsfeed) 发表:分离效果的好坏,取决于什么?

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  • 快乐

    第21楼2010/04/13

    应助达人

    毒性没有哪么大,雪妖可以放心。

    雪妖(Czj_1027) 发表:哇塞,好怕怕哟,下次小心了,当时做的时候弄在手上也没有怎么冲洗,很不好的习惯

    因为是盐,每次用完都洗得很干净,有的时候干脆冲一个晚上的,低流速冲的

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