plexu您好！我有以下问题想请教：
我前几天刚刚装上一个新的C18柱，在进样之前我用100%的甲醇冲了半个多小时。刚才看到上面写的要活化什么的？不知道我只冲洗半小时就开始用对柱子有没有影响？对出峰什么的有没有影响呢？谢谢！

选择柱子属于色谱方法开发的问题，一般为避免走弯路或无谓重复别人已做过的工作，总先查文献报道，在文献上条件的基础上再进行优化。色谱方法开发和色谱柱选择的一般原则请阅这个帖子http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20100708/2653056/。
提高分离度可从三个主要影响因素来考虑，柱效、选择性和保留因子。可通过减小填料粒径和增加柱长提高柱效；选择性和固定相选择以及pH条件有关，通过选择合适的色谱柱和合适的pH，可以提高选择性；有时候适当延长出峰时间增加保留因子，也可提高分离度。
苯基柱用于含苯环的芳香族化合物的测定时，具有较高的选择性。CN柱可作为一个保留能力最弱的反相柱使用，也可作为一个活性降低的正相柱使用（保留时间比硅胶柱和氨基柱低很多）。
长度和粒径都是用来改变柱效的，选择原则是够用就好。

应助达人

现在的接口还没有标准化吗，除了检测池的出入管较小外，色谱柱的接口与ＰＥＥＫ头不匹配的有哪个型号的色谱柱，以后使用的时候需要注意一点。同时发现使用过金属接头的色谱柱再换成ＰＥＥＫ头，常易漏液，这是因为金属头易使色谱柱接口变形吗？

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不是所有的测定，都需要对新柱子用所测样品老化。但先按方法程序进样几针，观察到峰面积保留时间不再有明显变化，再开始正式测定，这是一个好习惯。按你现在的做法，如果第一针和第二针的峰面积、保留时间没有变化，就继续做没影响吧。

色谱柱接头其实大都不是色谱柱厂商自己生产的，供货商有多个，VICI，Upchurch，Parker等，他们的标准相互之间不统一，那色谱柱接头的标准就统一不起来。不过一般这个问题也不难解决的，换个接头就可以了，而且现在有了万用接头，可以配所有不同类型的柱头，不泄露，连接死体积又很小。

一般活化柱子已经包含在测定柱效里面了，测定柱效才是关键。

个人感觉，选择柱子根据目标物的结构就行了，就这么几种柱子，没必要拘泥于理论，实际经验最重要。根据目标物的结构得到它的PH，溶解性，疏水性等一些性质我们就能知道用什么模式保留比较好。LC关键是前处理要下大工夫。

plexu您好！我有以下问题想请教，
请问：普通的C18柱能作为正相色谱柱使用吗？正相色谱体系中最常用也最普通的是那种色谱柱。正相柱在使用过程中与反向柱相比有什么需要注意的地方，谢谢！！

柱前衍生优点：可以人工衍生，操作简单。缺点是，引入了副产物，对柱子可能有负面影响，而且人工衍生也会使结果的准确度和重现性有差异。
柱后衍生优点是：重现性好，引入物质少。缺点是，有扩散问题，在柱子中分离结束后，就存在扩散，如果衍生慢（必然流速低）、管路长扩散问题就会比较严重，对于设备要求较高。