分叉峰有很多原因，但大部分是柱子筛板上有颗粒物堵塞的原因。你可以先简单将柱子反冲一下，如果分叉问题解决了，就什么都不用往深的想了。

你看压力稳定不？我估计很有可能是柱子的问题，柱子里面有强保留性物质，建议先把柱子清洗干净，用甲醇或者异丙醇冲洗，不接检测器。

C18色谱柱用用磷酸盐，醋酸盐就比较好啊，离子对试剂不是个好东东，你要慎用。我们做三聚氰胺用三氯乙酸

你用什么流动相？有可能是你的流动相的问题，230可能已经快到你流动相的截止波长了，当然紫外吸收强，基线漂移厉害

新柱子先用甲醇平衡，测定前再用流动相平衡，平衡的目的是测定前把基线走平，最后才是在正式测定前用样品去平衡（也可称饱和或老化）柱子。
短肽和溶剂峰差不多时间出来，很明显是保留不足的问题。解决极性物质在反相柱上保留不足的方法详见此帖：http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091215/2270999/。一般的办法是：提高流动相中水相的比例，譬如用100水做流动相；调pH值使待测物处于分子态不电离；加离子对试剂（多肽和蛋白测定中一般加0.1%的TFA三氟乙酸）。

这倒是没试
因为仪器不是我们实验室滴
那柱子出了什么问题，会造成这样的结果呢？
是柱子的键合相流失的原因么？

仪器不同，柱子也不是一根柱子
那柱子的什么问题 会造成这样的结果呢？，别的样好好的呀，是一个九肽，迷茫中

可是走其他的样好好的呀
还没有反冲过柱子
反冲的话要注意什么呢

一般是柱子脏了，或者固定相坍塌了，把柱子反冲下就好了，这个很容易搞定的

色谱柱安装技巧不多，只要接头和柱头匹配，确实拧紧不漏就可以了，但也要注意不要拧得太紧以至于损伤螺纹。

所谓死体积就是完全不保留的物质出峰时从进样到流过色谱柱的总体积，一般用极性非常强的尿嘧啶的出峰来测定。死体积包括柱体积（色谱柱内溶剂能占据的空腔体积）和柱外体积两部分。你从厂商这里买到色谱柱，柱体积已经是固定了，你能尽量避免减少的是柱外体积。进样器内死体积、毛细管长度、毛细管和色谱柱连接紧凑与否，保护柱或在线滤器产生的死体积大小，都对这个有影响。样品在柱内，除扩散外，还有和填料作用引起的组分分离；但样品在柱外，那就只有扩散这个使柱效下降的因素了。所以，要取得好的分离效率，柱外体积应该是越小越好。

峰有时候前延，有时候拖尾，一般不是色谱柱的问题，应该是样品和色谱柱填料的作用问题，可以说如果色谱柱类型选择没问题，关键就是色谱条件的选择。包括进样量、样品溶剂、流动相组成（包括添加剂）、流动相pH以及柱温，都对峰形有影响。另外测定分子量较大的多肽，用样品老化平衡色谱柱很重要，分子量越大的物质，需要平衡时间越长。如果柱子没平衡好，峰形也可能会不正常。所以最好把你具体的测定条件也列一下，也便于有针对性的分析原因。