+关注 私聊
  • 纸鸢

    第213楼2010/08/01

    现在的流动相中都加的有TFA,用98水做流动相还是不行,100水的话不是对柱子不好么?
    “调pH值使待测物处于分子态不电离;”这个不会做

    plexu(plexu) 发表:新柱子先用甲醇平衡,测定前再用流动相平衡,平衡的目的是测定前把基线走平,最后才是在正式测定前用样品去平衡(也可称饱和或老化)柱子。
    短肽和溶剂峰差不多时间出来,很明显是保留不足的问题。解决极性物质在反相柱上保留不足的方法详见此帖:http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20091215/2270999/。一般的办法是:提高流动相中水相的比例,譬如用100水做流动相;调pH值使待测物处于分子态不电离;加离子对试剂(多肽和蛋白测定中一般加0.1%的TFA三氟乙酸)。

0
    +关注 私聊
  • 问无止境!

    第214楼2010/08/01

    讲座人气很旺啊,坐在后排慢慢学习。

    想请教下plexu版主,液相色谱柱一般使用寿命多长?不同类型的色谱柱是否寿命也不一样?液相色谱柱与气相的柱子有何区别呢?

0
    +关注 私聊
  • 纸鸢

    第215楼2010/08/01

    可是,那为什么走别的样就好好的呢?
    还有没有是别的原因造成的呢?
    反冲,一般选用什么试剂,有什么需要注意的吗?以前没有反冲过

    xue2009(xue2009) 发表:一般是柱子脏了,或者固定相坍塌了,把柱子反冲下就好了,这个很容易搞定的

0
    +关注 私聊
  • plexu

    第216楼2010/08/01

    可是走其他的样好好的呀
    还没有反冲过柱子
    反冲的话要注意什么呢[/quote]

    可能你走其它样品的时候,柱子没被污染。你试一下,已经产生裂峰后,再进其它样品,看是不是峰还是分裂的?当然颗粒物堵塞筛板,只是一个最可能的裂峰产生原因,但不是唯一的,你排除是这个原因后,再往下排查。

    反冲的时候,不接监测器,可以用流动相低流速(0.2ml/min)反冲过夜,或者以正常流速冲1-2小时吧。

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:分叉峰有很多原因,但大部分是柱子筛板上有颗粒物堵塞的原因。你可以先简单将柱子反冲一下,如果分叉问题解决了,就什么都不用往深的想了。

0
    +关注 私聊
  • xue2009

    第217楼2010/08/01

    使分子不电离很简单啊,酸性物质把PH调到PKA值以下两个单位,碱性物质把PH值调到PKA以上两个单位。

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:现在的流动相中都加的有TFA,用98水做流动相还是不行,100水的话不是对柱子不好么?
    “调pH值使待测物处于分子态不电离;”这个不会做

0
    +关注 私聊
  • xue2009

    第218楼2010/08/01

    那我估计就是你样品的问题,你样品是拿流动相溶的不?注意溶剂强度不能大于流动相强度。还有,你样品PH值调了没?你调样品PH值做下看。

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:可是,那为什么走别的样就好好的呢?
    还有没有是别的原因造成的呢?
    反冲,一般选用什么试剂,有什么需要注意的吗?以前没有反冲过

0
    +关注 私聊
  • 419321023

    第219楼2010/08/01

    太有用了 希望以后有更多的东西分享 太感谢了

0
    +关注 私聊
  • 小卢

    第220楼2010/08/01

    [div][/div]

    原来一直以为磷酸盐没那么厉害,只是在结晶上很容易堵塞管路,现在看来还是很严重的!

0
    +关注 私聊
  • 乐果

    第221楼2010/08/01

    用的是甲醇和水,以前用乙腈时230nm基线是向下漂移,后来用甲醇就有向上漂移,270nm也飘移只不过没那么明显,如果用缓冲盐,能不能减轻,请问有什么好的办法?

    xue2009(xue2009) 发表:你用什么流动相?有可能是你的流动相的问题,230可能已经快到你流动相的截止波长了,当然紫外吸收强,基线漂移厉害

0
    +关注 私聊
  • gaoxiaoyexian

    第222楼2010/08/01

    plexu您好:
    你在色谱柱保存里面有提到“CN基柱在有机极性溶剂中柱床不稳定(会导致柱床结构坍塌),适合在水相中低温保存。低温保存要确保不发生固定相冻结而损坏柱床”
    我有以下问题想请教:
    1。“水相”指的是什么?纯水?
    2。我们实验室的CN基柱保存在40%的乙腈里面,这个有不良后果吗?
    3。CN基柱应该怎样维护才好呢?比如做完实验用什么流动相冲柱子、短期用什么溶剂保存、长期用什么溶剂保存等等。
    先谢啦!!

0
查看更多