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  • xue2009

    第56楼2010/07/26

    它的意思是说甲醇是质子酸，乙腈是非质子酸，做流动相时选择性有差异

    yongzhbenq(yongzhbenq) 发表:《高效液相色谱方法及应用》于世林编著的上面说：乙腈为质子给予体、甲醇为质子接受体、四氢呋喃是偶极溶剂，应该除了极性影响，还有另外的影响因素，至于分离机理，还是比较复杂的，不能看成是个万能方法

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  • xieqinqin

    第57楼2010/07/26

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：用的是四元梯度泵 A50%甲醇 B50% 水 经常出现停 或进气泡 这是什么原因？

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  • xue2009

    第58楼2010/07/26

    这个比例下因为使得流动相黏度最大，所以最容易产生气泡了，一般我们设计洗脱程序都避开这个比例。

    xieqinqin(xieqinqin) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：用的是四元梯度泵 A50%甲醇 B50% 水 经常出现停 或进气泡 这是什么原因？

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  • 有水有渝

    第60楼2010/07/26

    应助达人

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    　请问：资料显示：在正常条件下，填料粒度＞20µm时，干法填充制备柱较为合适；颗粒＜20µm时，湿法填充较为理想。填充方法一般有4种：①高压匀浆法，多用于分析柱和小规模制备柱的填充；②径向加压法，Waters专利；③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；④干法。柱填充的技术性很强，大多数实验室使用已填充好的商品柱。为什么以20um为分界点？填料方法的前三种都是湿法吗，能不能对四种填充方法做一个简短的说明？谢谢！

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  • xingwangyang

    第61楼2010/07/26

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：我在用液相测定多肽样品时遇到下列问题
    1.流动相是A1％三氟乙酸水溶液，B1％三氟乙酸乙腈溶液 波长210 平衡时间太长 基线波动很大 是什么原因？怎么改善？
    2.用过后的C18柱怎么清洗比较好。

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  • 有水有渝

    第62楼2010/07/26

    应助达人



    请问：如果不使用不锈钢接头，而改用ＰＥＥＫ头，是否可以完全解决接头匹配问题？

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  • xue2009

    第63楼2010/07/26

    我认为是三氟乙酸含有杂质的问题，再有可能就是柱子被污染了，平衡时不断有杂质洗脱除，建议你把柱子好好冲洗看看

    xingwangyang(xingwangyang) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：我在用液相测定多肽样品时遇到下列问题
    1.流动相是A1％三氟乙酸水溶液，B1％三氟乙酸乙腈溶液 波长210 平衡时间太长 基线波动很大 是什么原因？怎么改善？
    2.用过后的C18柱怎么清洗比较好。

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  • 有水有渝

    第64楼2010/07/26

    应助达人

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：有的厂商为避免堵塞，使用了较大孔径（2-5um）的前筛板，这种情况反冲会将填料冲出。那么，你们在使用说明书中会说明前后筛板的孔径吗？

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  • 有水有渝

    第65楼2010/07/26

    应助达人

    这个应该说反了吧？乙腈为质子接受体、甲醇为质子给予体

    yongzhbenq(yongzhbenq) 发表:《高效液相色谱方法及应用》于世林编著的上面说：乙腈为质子给予体、甲醇为质子接受体、四氢呋喃是偶极溶剂，应该除了极性影响，还有另外的影响因素，至于分离机理，还是比较复杂的，不能看成是个万能方法

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  • xingwangyang

    第66楼2010/07/26

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：我在做多肽药物时遇到下列问题
    1. 基线不稳定波动大 流动相 A ：1％TFA水溶液 B:1％TFA乙腈溶液 检测波长210nm 流速：1.0ml/ml 什么原因？怎么解决？TFA有什么作用？
    流动相中不加TFA见不到主峰，基线良好。
    2. 做完肽类样品时 怎么冲洗C18比较好？
    3. 药典上介绍测定分子量大于2000的样品，选择柱子填料的孔径为30nm，30nm与10nm对结果有什么区别

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