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  • 有水有渝

    第67楼2010/07/26

    应助达人

    有没有配在线脱气机，如果有还是如此的话，看看流动相进入比例阀前的那段管路有没有气泡，如何有，可能是脱气不完全或过滤头污染，如果没有，那可以是比较比例阀或单向阀污染，用水和异丙醇反复清洗几遍管路试试。

    xieqinqin(xieqinqin) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：用的是四元梯度泵 A50%甲醇 B50% 水 经常出现停 或进气泡 这是什么原因？

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  • 有水有渝

    第68楼2010/07/26

    应助达人

    1、色谱柱的技术我认为主要体现在载体形态（球形）和纯度（高纯，低重金属），填料键合度，色谱柱不锈钢管内壁的光洁度，装填技术等。封尾的作用主要体现在减少拖尾，同时保护硅胶载体。

    2、差距其实都在第一点里了，我觉得国内主要的差距还是在装填技术，因为填料大家基本上都可以购买，当然在成本控制上也有差距。

    老多_小多(emoc98311) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教
    问题：
    1.色谱柱的技术都有哪些？比如封尾等，这些技术在应用时都体现在哪里？
    2.色谱柱技术的差距在哪里？

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  • 有水有渝

    第69楼2010/07/26

    应助达人

    其实最基础的才是最重要的！也欢迎分享你在基础知识之上见解。

    xue2009(xue2009) 发表:讲的都很基础，都是些最基本的东西。

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  • xue2009

    第70楼2010/07/26

    TFA在这里起对离子的作用

    xingwangyang(xingwangyang) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：我在做多肽药物时遇到下列问题
    1. 基线不稳定波动大 流动相 A ：1％TFA水溶液 B:1％TFA乙腈溶液 检测波长210nm 流速：1.0ml/ml 什么原因？怎么解决？TFA有什么作用？
    流动相中不加TFA见不到主峰，基线良好。
    2. 做完肽类样品时 怎么冲洗C18比较好？
    3. 药典上介绍测定分子量大于2000的样品，选择柱子填料的孔径为30nm，30nm与10nm对结果有什么区别

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  • 东风恶

    第71楼2010/07/26

    非常感谢姚总的精彩讲解，感觉很多问题都迎刃而解了！目前还没有问题可提了。

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  • 小卢

    第72楼2010/07/27

    这个问题我考虑过！但有个担心的问题，就是由于我们的大多检测标准时欧盟或美国药典标准，因此填料、柱长、直径都固定了，如果选择保护柱的话，还需要考虑那么多吗？

    plexu(plexu) 发表:如果用一个质量好的又和分析柱匹配保护柱，应该不会影响分析。匹配指的选用柱芯填料和分析柱填料在粒径和固定相类型上一致，质量好，首先要求柱芯装填质量一定要好，不能因为是柱芯，就随便把填料用干法往里面一放就完事了；另外柱芯卡套接入系统的产生的死体积要小。
    一个质量好的保护柱，有时还能增加分离柱效。

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  • 小卢

    第73楼2010/07/27

    看来色谱柱行业和仪器行业差不多啊，都是进口占主要啊！其实能叫出来的国产色谱柱品牌也的确不是很多啊！但愿国产能占一席之地啊！

    plexu(plexu) 发表:国内填装会出现质量小问题，和国内目前普遍做事没有国外严谨有关吧。如果工艺技术上没有问题，又能制订并切实执行一整套严格的生产质量管理措施，国内填装和国外填装并无区别。

    国内色谱柱市场还没有人进行过科学统计，连一年色谱柱销售总量也众说纷云，更别说国内生产色谱柱所占份额了。我估计是占30%左右吧。

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  • 小卢

    第74楼2010/07/27

    不会啊，我怎么没有遇到的这个情况啊？是不是脱气机有问题啊？

    xue2009(xue2009) 发表:这个比例下因为使得流动相黏度最大，所以最容易产生气泡了，一般我们设计洗脱程序都避开这个比例。

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  • majinfei8

    第75楼2010/07/27

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：waters Atlantis C18柱可以用较高比例的流动相，那麽用完后应该怎麽清洗？在什麽体系中保存比教合适？谢谢。

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  • senfly

    第76楼2010/07/27

    我们公司有好多台HPLC，但有一台总出问题，是走的液总跟设定的程序不一样，不知道是电脑原因还是机子原因

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