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  • 〓猪哥哥〓

    第18楼2010/09/23

    90%甲醇的缓冲液,盐是不是已经析出来了。

    90%甲醇冲洗相比100%甲醇清洗效果差不多,100%甲醇对水溶性强的物质还没有90%洗脱好。

    有水有渝(xky0230699) 发表:1、建议先使用10:90的甲醇水进行相应管路的冲洗,当然,如使用与流动相相应比例的甲醇与水冲洗系统管路效果会更佳。
    请问,为什么呢,如果我用的是缓冲盐-甲醇(10:90)的流动相,那么最好是用90%的甲醇清洗?
    2、使用甲醇:水=90:10冲洗30分钟,而后在使用甲醇:水=50;50冲洗30分钟即可。
    请问,有没有可能出现甲醇:水=90:10清洗不干净的情况,你觉得有没有必要用100%甲醇清洗一下?长期保存色谱柱是应保存在什么试剂里?

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  • 〓猪哥哥〓

    第19楼2010/09/23

    50%的甲醇为什么对色谱柱寿命有影响?

    很多说明书里面最初始色谱柱也不是保存在100%有机溶剂中

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  • 有水有渝

    第20楼2010/09/23

    应助达人

    事先混合好再抽滤应该没事,再说有时梯度运行到这个浓度也没见有什么问题。

    〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:90%甲醇的缓冲液,盐是不是已经析出来了。

    90%甲醇冲洗相比100%甲醇清洗效果差不多,100%甲醇对水溶性强的物质还没有90%洗脱好。

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  • youlaila

    第21楼2010/09/24

    我很少用到甲醇,一般先5%乙腈冲洗半小时,再95%乙腈冲洗半小时然后保存

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  • 张驰有度

    第22楼2010/09/24

    如果流动相有缓冲盐,开始冲洗时最好还是用纯水比较好.否则盐容易析出.

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  • xhd1_moon

    第23楼2010/09/24

    我们一般先用10%乙腈/水冲洗30到60分钟,再用纯甲醇冲洗30到60分钟。楼主色谱柱再生的方法不错,学习了。

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  • wangals0623

    第25楼2010/09/27

    我们一般用的是50:50的乙腈水冲洗系统,再用纯的乙腈饱和柱子保存

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  • wangjinxiang825

    第26楼2010/09/29

    [quote]原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:1、建议先使用10:90的甲醇水进行相应管路的冲洗,当然,如使用与流动相相应比例的甲醇与水冲洗系统管路效果会更佳。
    请问,为什么呢,如果我用的是缓冲盐-甲醇(10:90)的流动相,那么最好是用90%的甲醇清洗?
    2、使用甲醇:水=90:10冲洗30分钟,而后在使用甲醇:水=50;50冲洗30分钟即可。
    请问,有没有可能出现甲醇:水=90:10清洗不干净的情况,你觉得有没有必要用100%甲醇清洗一下?长期保存色谱柱是应保存在什么试剂里?
    1.一般管路走缓冲盐后必须先用一定的有机溶剂和水将管路中的盐冲洗干净,不然,走缓冲盐的管路如立即走有机溶剂会析出盐,对柱塞杆可能会导致盐的磨损划痕而对线预柱会导致易堵塞,系统反压升高。另外,系统管路可能会因此进入气泡包括单向阀中会可能吸入气泡。
    2.甲醇:水=90:10对于一般有机物冲洗30至40分钟已经足矣,但对于强保留物质的确不一定冲洗下来,此时您使用100%甲醇也与90%甲醇水的冲洗效果无二异,因此此时可以采用氯仿或THF进行冲洗,后再逐步过渡到文中所提的短暂的保留溶剂中。(50%的甲醇水中)。长期保存色谱柱请采用厂家建议的方法。A.100%乙腈中B.65%乙腈水中。
    感谢您的提问!谢谢!

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  • wangjinxiang825

    第27楼2010/09/29

    不客气。谢谢您的鼓励。希望有机会在您的版面发表一些自己的心得与您再一起交流。谢谢!

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  • wangjinxiang825

    第28楼2010/09/29

    有道理,甲醇:水=50:50系统突然走起来压力是比较大,是陡然增大,可以采用设置梯度冲洗的方法进行,在WATERS的EMPOWER软件中可以采用设置洗脱曲线的方法,可以采用曲线7-9,这样变化缓慢,系统不会产生大量异常--如气泡或中间因压力异常变动的停机。也可以先混合成50:50运行,但这样比较麻烦些。

    windy1987(windy1987) 发表:50:50甲醇水
    如果利用仪器来混合不是太好吧,有些仪器会产生大量气泡,同时压力会加大!

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