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  • isee

    第11楼2010/10/13

    不错,期待新的内容,顶

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  • xue2009

    第12楼2010/10/13

    "每隔10 nm提取一张色谱图",是什么意思?说实话我也不懂,期待解释。谢谢

    小丑(joker) 发表:严格来说,您分析的样品应为发酵产物乙酸乙酯萃取物,样品中化合物的种类复杂并且有待于定性。此时,本人建议您这样做:二极管阵列检测,采集数据后,在230 nm-400 nm波长范围内,每隔10 nm提取一张色谱图;如果样品溶液有颜色,应在230 nm-800 nm范围内每隔10 nm提取一张色谱图。“DAD同时检测5个波长”,这是采集数据的情况下可同时监测5个波长,实际上在数据后处理部分,您想要哪个波长下的色谱图都可以。还需要在熟悉一下仪器操作啊。

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  • cryingleaf

    第13楼2010/10/13

    DAD检测器的话,可以选择保存指定波长范围内(比如190nm-400nm)的所有紫外数据,通过工作站,可以把不同波段的谱图都调出来。
    比如虽然方法里的检测波长是254nm,但你如果同时选择了保存190-400nm所有紫外数据,且检测器的分辨率为2nm,那么你的分析结果里实际上可以调出190-400nm范围内任意波长(间隔为2nm)下的色谱图。

    xue2009(xue2009) 发表:"每隔10 nm提取一张色谱图",是什么意思?说实话我也不懂,期待解释。谢谢

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  • Eda

    第14楼2010/10/13

    HPLC-DAD检测器分析后,获得的是以保留时间为X轴、以响应值为Y轴、以波长为Z轴的三维色谱、光谱图,数据中,分析者可以在三维图上找出任一波长(波长应处于采集数据时的波长范围)的色谱图。用了DAD后您就明白多了。

    xue2009(xue2009) 发表:"每隔10 nm提取一张色谱图",是什么意思?说实话我也不懂,期待解释。谢谢

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  • athinkstone

    第15楼2010/10/13

    写的很好,谢谢分享

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  • 泰然处之

    第16楼2010/10/13

    写的很详细,说的很明白!支持!

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  • wangmeibao

    第17楼2010/10/13

    很好啊,继续啊

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  • laina0319

    第18楼2010/10/13

    有用,谢谢楼主,我有个问题想请教一下,我在用超高效液质分析多环芳烃,但是灵敏度不高,有没有什么方法改善,比如说在流动相中添加某写些物质,或者使用一些缓冲液。还有,我用的流动相是甲醇水,初始梯度80%,我的样品溶剂甲醇水1:1,效果是不是最好的?我接触色谱的时间不长,有什么说错的地方还请大家海涵。

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  • wdl158160

    第19楼2010/10/13

    请教一个问题:为什么样品溶剂的洗脱强度明显高于流动相洗脱强度会造成色谱峰分叉?

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  • 小丑

    第20楼2010/10/14

    答:进样后,样品溶液与流动相接触,如果二者的溶剂不一致,会出现下列两种情况:
    其一,样品溶剂与流动相间存在浓度差,这个浓度差指的是溶剂浓度差(比如流动相中有机相浓度较低,样品溶剂有机相较高),此时样品溶剂扩散速度快,造成样品峰展宽;不论进样体积大还是小,只要流动相溶剂与样品溶剂不一致,基本都会发生这种不必要的展宽,但不一定会分叉;
    其二,样品溶液溶剂与流动相组成差别较大时,样品溶液与流动相的混合不能瞬间完成,就会导致“球状”样品溶液由核心到边缘存在浓度差,核心有机相浓度高,向边缘逐渐降低。进入色谱柱后,边缘部分样品分子随流动相正常移动,而核心分子因溶剂氛围有机相较高,在色谱柱中移动较快,反映在色谱图上就是前延,甚至前分叉。减小进样体积,柱前可以充分混合,可以消除分叉。

    wdl158160(wdl158160) 发表:请教一个问题:为什么样品溶剂的洗脱强度明显高于流动相洗脱强度会造成色谱峰分叉?

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