我可不可以大胆的怀疑，你的药品名字叫丹参片，实际不是丹参片，也就是说，这个是假药。

另外我觉得有可能是样品处理问题造成的，或者说样品浓度很低很低。

本人将主贴内容进行了更新，增加了各次内容的谱图和数据，并根据情况调整了实验方案，望各位版友能持续观注！！！

你梯度洗脱的标样有两个峰，而你做标准曲线的时候，标样只有一个峰，是不是有点问题呢？
我的意思是，标准曲线做的时候，后面的峰没有洗脱出来？

不应啊！丹参酮应该是很好做的
我怀疑是你的仪器或者流动相出问题了
排除问题：
1、换台机子
2、把流动相配制在一个瓶子
3、换根柱子
4、把流动相的过滤头清洗一下（包括水相和有机相）

1样品提取问题,2过滤头选择问题

前些日子做样品遇到了相同的问题，运用成熟的方法，却怎么也没峰检出，害我忙活了3天，最后才发现自己犯了一个超低级的错误，流动相A和B弄反了。请楼主再检查一下你流动相，看看是不是插错了位置了？我是过了3天才发现有机相没怎么变化，以为是泵堵了，结果是B泵放进了A瓶中，所以怎么也不出峰。依我看80%的甲醇换成80%的水，是怎么也不出峰的，结果是梯度反而会有少许检出峰。
“先前甲醇由60%梯度到90%，改为甲醇由70%梯度到95%”如果是我所说的原因的话，那么60%的梯度的确要先于70%的出峰，期待楼主解决问题继续更新~

这是主贴的补充贴，是将第一天的紫外结果贴出来了，并就诸多版友的热心帮助进行了回应，坦诚了自已的观点，并就今天做的相关实验内容与版友进行分享，并再次就本项实验内容中的疑惑向版友求助？


下面第一个图是第一天标样紫外测定的标准曲线及桨法7个溶出样品的定量测定结果,第二个图是标样第一天紫外测定的标准曲线及转篮法7个溶出样品的定量测定结果,可以看在第5、6、7个时间点取样均有明显的溶出，让版友怀疑丹参片可能是假药而不含丹参酮IIA的想法不成立，从紫外的结果可以确信标样与溶出样品均有丹参酮IIA，只不过标样与溶出样品溶剂有区别，在同样的色谱条件下，标样能正常出峰，而溶出样品不出峰，所以我还是认为溶出介质中的盐酸在捣鬼，有可能如版友所说发生解离，或是盐酸影响了固定相。另外高效液相色谱仪、流动相、色谱柱都应该没有问题，因为我今天重新利用丹参酮母液配制了丹参酮IIA系列标液，溶剂采用85%甲醇，并采用与第一天同样的色谱条件、同样的色谱仪器、同厂的色谱甲醇及超纯水，同样的色谱柱，进了六针，分别是空白和5个标样，5个标样都能正常出峰，保留时间与第一天的几乎一致，标准曲线的线性良好，所以版友猜测色谱仪、色谱柱及流动相可能存在问题的想法是不成立的，所以我下一步我打算在流动相中加入缓冲盐，选醋酸或磷酸，不知各位版友有什么高见？

我下一步我打算在流动相中加入缓冲盐，选醋酸或磷酸，不知各位版友有什么高见

流动相中加入酸可以试试。

但是先确定到底是不是盐酸对成分的破坏
做个对照试验，不知道样品是否溶解到水里面。选择溶出介质（小试）为水，盐酸，甲醇，再分别进样，观察是否有峰出现。

这两个色谱图是同样的条件下走的吗？只是分析时间不同？

但是这两张图谱相差很大哦

从后面的图谱中看到有杂峰出来了。标样稳定性怎么样？对酸、碱是否敏感