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  • dfldxt

    第31楼2010/12/29

    顺便问一下,反应液你们配好了,最多可以等多久放到仪器里面起泡,不会变质,我总担心不马上放到仪器里面会有问题

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  • yinbing

    第32楼2010/12/30

    我们氢氧化钠和盐酸都是分析纯,优级纯的就只氯化钠,采购不买我们需要的东西,啥办法列。现在讨厌的是走基线的时候在酪氨酸出峰的位置有个小包(B3—B4转化引起的),结果使得酪氨酸定量不准,没有解决的办法!
    丙二醇甲醚也好,乙二醇甲醚也好,都只是提供个溶媒而已,作为反应液用,并不通过分离柱,分析纯应该是可以接受的。835-50,也就是L=8900的前身,是使用乙二醇甲醚,之所以后来改用丙二醇甲醚,我猜是不是乙二醇甲醚毒性太大了?这个我问过工程师,是可以代替的。
    重新装柱子,得把树脂全冲出来,进行处理,再装,麻烦。
    我们主要做氨基酸注射液和原料,还是属于比较干净的样品,有时也会做饲料级,那就不好说了。

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  • yinbing

    第33楼2010/12/30

    在配R1的时候,动作要快,迅速过滤后立即倒入试剂瓶。
    茚三酮的显色效果,看标准中胱氨酸的峰高,在110左右,就是好的,下降的厉害,说明已经变坏了

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  • GG

    第34楼2010/12/30

    想问问,你用的是哪里的试剂,产地?纯度级别?

    使用过程中,发现柱压越来越高,甚至14—15MPa,不知道你那边是不是这样.
    个人感觉L-8900不太好用,特别是柱子很容易脏

    国产试剂的杂质含量比较高,分析纯的试剂如果含有的重金属离子比较多,对离子交换树脂会造成极大的损害,别说是色谱柱了,就是我们家里的下马桶的下水道如果什么垃圾都往里面扔,不也是会堵吗?对于色谱来说,什么样级别的色谱仪就需要什么样的试剂、样品前处理过程。柱子容易脏的原因,你自己写的很清楚啊,采购不购买你们所需要的试剂所以造成你们使用色谱的时候柱子损耗非常大。除了试剂外,还有最一个因素就是样品前处理的干净成度,该除的就除,该过滤的就过滤(要用规定孔径的滤膜)。
    我们实验室的HPLC如果长期使用分析纯的甲醇、乙腈的话,色谱柱的损耗也是非常大的,如果LC-MS也用分析纯的话,就更不用说了。所以出现问题要分析问题出在什么地方,只有这样才能找到解决问题的真正原因。

    另外还提到一个色谱柱填装是否麻烦的问题,如果拧个螺丝,连接各管路,都算是麻烦的话,那就建议直接购买成品柱,这就牵扯到,成本的问题了,泱泱中华,地大物博,楞是生产不了这点树脂,怎们办?只能买!

    至于价格的问题,看的是性价比,用的好,2克树脂可以重复用很多年,用的不好的,还没离心完就发现离心管破列了。

    再说楼主的谱图:楼主的谱图分离的基本上没有什么问题,所以试剂配方没有问题,但是噪音这么大的主要原因是试剂质量有问题(我没仔细看是分析纯还是色谱纯的),还有一个就是配置试剂过程中称量、取液的准确度。

    楼主应该是南方城市的,没有暖气,所以温度过低会造成一定影响,好比人嘛,冷了肯定要加衣服保暖啊,仪器也是。

    yinbing(yinbing) 发表:我们氢氧化钠和盐酸都是分析纯,优级纯的就只氯化钠,采购不买我们需要的东西,啥办法列。现在讨厌的是走基线的时候在酪氨酸出峰的位置有个小包(B3—B4转化引起的),结果使得酪氨酸定量不准,没有解决的办法!
    丙二醇甲醚也好,乙二醇甲醚也好,都只是提供个溶媒而已,作为反应液用,并不通过分离柱,分析纯应该是可以接受的。835-50,也就是L=8900的前身,是使用乙二醇甲醚,之所以后来改用丙二醇甲醚,我猜是不是乙二醇甲醚毒性太大了?这个我问过工程师,是可以代替的。
    重新装柱子,得把树脂全冲出来,进行处理,再装,麻烦。
    我们主要做氨基酸注射液和原料,还是属于比较干净的样品,有时也会做饲料级,那就不好说了。

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  • dfldxt

    第35楼2010/12/30

    楼上的很专业啊,我是尽量买优级纯的,但有的买不到,你们都用色谱纯吗,至于称样,我觉得还比较准确
    我的试剂是这样的;缓冲液用的柠檬酸、氯化钠、乙醇用的是上海国药的优级纯,柠檬酸钠是天津光复的优级纯,苯甲醇是上海凌峰的分析纯,辛酸是国药的优级纯,无水醋酸钠是国药的分析纯

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  • 果果

    第36楼2011/01/01

    天气冷了,做实验时遇到的问题也会多

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  • chengjingbao

    第37楼2011/01/03

    本篇出现的问题,是实验室高手和低手分水岭,分析是个系统工程,并不是单独成立的,这类经验是可以触类旁通的,作者的分享对个人的成长太有用了!赞一个。

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  • haohaodexuexi

    第38楼2011/01/05

    温度对实验的影响很大!!

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  • star_05240721

    第39楼2011/01/05

    儀器設備不都要恆溫恆濕嗎?我們的試驗室是24H開空調的

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  • chenyl5296

    第40楼2011/01/13

    标样Leu、Tyr、Phe三个的分离度可以通过优化缓冲液转换的时间提高分离度的,我用的也是L-8900,大家能互相交流一下吗?谢谢!

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