第一，你说的杂质峰可能是色谱条件的问题，如果不走梯度的话试试。还有干扰的话，你就试试SPE柱。如果还有干扰，就不是蛋白的原因，你就采取反提的办法。这个干扰峰有可能是内源性杂质而非蛋白。

1400r/min也用过了，还是那么多，可能是我需要测得成分比较低的原因吧，就连基线（梯度，曲线为6）走出来都是上坡下坎的，哎.......而且还发现水浴后在醇沉，所有的东西都会有损失在30%左右，本来含量就低，再损失.............
谢谢各位了，我已经决定了就用我用过的方法中最好的水浴法，虽然还是有那么多的蛋白质............

蛋白如果是溶解的，靠一般离心和微孔滤膜是除不去的。
我觉得不用考虑层析了，因为它们的理化性质应该很相近，液相的分辨率要比一般层析高多了。根据分子量的差别，可以考虑超滤，超滤截留分子量可以从几千到几万，自己选择。

新手 所以没有资格说话

1500r/min都试过了。还是不行，

超滤离心管截留分子量可以从几千到几十万，处理量从0。5~80毫升，根据处理量的不同，价格在20元至200元左右。
不过要达到彻底分离，你的目标蛋白和杂质蛋白分子量要相差至少5倍以上，所以此方法不是肯定行得通，你可以试试

怎么知道干扰的物质是蛋白呢?
调一下流动相的pH值试试看能不能好一点.
试试看吧!

我也觉得不一定是蛋白的事。

我也觉得不一定是蛋白的事。

用的什么检测器？看看杂质光谱图先确定是什么物质吧