减小峰展宽就是通过缩短样品与紫外光接触的时间来实现的，在色谱柱、流动相、梯度、流速等完全相同的条件下，uplc比普通hplc分离度要好，我曾经遇到过用uplc使用普通150mm，3.5um色谱柱开发的分析方法，在普通hplc上分离度明显下降不达标的问题。色谱峰面积变小只是一个副作用。

没遇到过，可能会有影响！！

峰展宽和检测器没关系,是样品区带展宽,不检测一样展宽.有了检测是只是能显示出这个展宽,不能改变本质.关键还是要减小系统体积,使用小粒径柱子高流速

减小系统体积和使用小粒径柱子、高流速这些都能降低峰展宽，缩短光程也是降低峰展宽的一个手段，因为光程变短，样品流经光路的时间变短，在色谱图上表现就是色谱峰变窄

没想到我这个求助贴变成pandora98和peterhello两位高手对决贴了，呵呵！

pandora98的观点和我询问过的工程师说的一致，缩短光程也是降低峰展宽的一个手段，要不我也不花那个钱去换个流通池，当然减小系统体积也是必须的。

可是，我这个帖子的初衷不是这个问题，还是我自己比较懒，等我实践一下再说吧。

光程变短,样品流经光路的时间是变长的,而不是变短的,请看一下检测器的光路图.样品流向,光路方向是在一条直线上的,而不是垂直关系

这个是某公司优化方法视频截图，用普通流通池，小体积样品峰通过流通池时就会造成峰展宽，而换成微量流通池就好了



用普通流通池，小体积样品峰通过流通池时就会造成峰展宽，而换成微量流通池就好了

图中红色管路中间的黄色线条即表示光程，对单个样品分子（或离子）而言，流速不变的情况下，其通过这段光程的时间必然是与光程长度成正比。理想状态下，色谱峰的峰宽即为最后通过光路的样品分子与最初进入光路的样品分子的保留时间之差。
光程变短，单个分子流经光路的时间变短，其吸收紫外光的能量减少；对于整个样品来说，其紫外吸收等于单个分子所吸收的紫外光的能量之和，也会相应减少，所以会有峰面积降低和峰宽减小的现象。

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相当好的图示

kakalhh(kakalhh) 发表:这个是某公司优化方法视频截图，用普通流通池，小体积样品峰通过流通池时就会造成峰展宽，而换成微量流通池就好了



用普通流通池，小体积样品峰通过流通池时就会造成峰展宽，而换成微量流通池就好了

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"单个分子流经光路的时间变短，其吸收紫外光的能量减少" >
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"单个分子流经光路的时间变短，其吸收紫外光的能量减少" >
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"单个分子流经光路的时间变短，其吸收紫外光的能量减少"
如果照这么说放在紫外分光光度计中的样品吸收值将随时间变化,只要不把比色皿取出来,吸收值就会越来越高了?
A=ELC和时间完全没有关系
样品区带体积一定,通过体积更小的流通池,时间必然更长.所以流通池体积要和峰容量相匹配
As a rule-of-thumb the flow cell volume should be about 1/3 of the peak volume at half height. To determine the volume of your
peaks, take the peak width as reported in the integration results multiply it by the flow rate and divide it by 3).
流通池体积不是越小越好,也不是越大越好.

pandora98(pandora98) 发表:图中红色管路中间的黄色线条即表示光程，对单个样品分子（或离子）而言，流速不变的情况下，其通过这段光程的时间必然是与光程长度成正比。理想状态下，色谱峰的峰宽即为最后通过光路的样品分子与最初进入光路的样品分子的保留时间之差。
光程变短，单个分子流经光路的时间变短，其吸收紫外光的能量减少；对于整个样品来说，其紫外吸收等于单个分子所吸收的紫外光的能量之和，也会相应减少，所以会有峰面积降低和峰宽减小的现象。