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  • xiaowang268

    第11楼2013/05/27

    大家能保证柱子再用之前是冲干净的吗

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  • xiaowang268

    第12楼2013/05/27

    流动相配比的纯水+相应有机溶剂？没明白，不是流动相吗？

    qingqingcao(qingqingcao) 发表:使用前用流动相配比的纯水+相应有机溶剂 冲洗。然后换上流动相。

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  • qingqingcao

    第13楼2013/05/28

    因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇（乙腈，四氢呋喃等）作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以，使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗，再换上流动相。

    假如： 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20 冲洗一段时间，然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

    具体的原因是：避免直接换上流动相，磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:流动相配比的纯水+相应有机溶剂？没明白，不是流动相吗？

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  • xiaowang268

    第14楼2013/05/28

    但每次用完后，柱子和系统都是用水将盐冲洗掉了啊

    qingqingcao(qingqingcao) 发表:因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇（乙腈，四氢呋喃等）作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以，使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗，再换上流动相。

    假如： 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20 冲洗一段时间，然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

    具体的原因是：避免直接换上流动相，磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。

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  • xiaowang268

    第15楼2013/05/28

    不过也同意你这种做法，还是保险些的

    qingqingcao(qingqingcao) 发表:因为RP-hplc 一般用磷酸盐缓冲溶液-甲醇（乙腈，四氢呋喃等）作为流动相。一般我们保存RP柱用纯的甲醇或乙腈保存。所以，使用前用流动相配比的纯水+相应的有机溶剂冲洗，再换上流动相。

    假如： 0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20, 那么开始用的时候用 纯水-MeOH=80:20 冲洗一段时间，然后再换上0.02mol/L磷酸氢二钾-MeOH=80:20。

    具体的原因是：避免直接换上流动相，磷酸盐析出使得色谱柱堵塞。

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  • qingqingcao

    第16楼2013/05/29

    不要直接上纯水洗涤RP柱子，应该在纯水中加些乙腈或者甲醇。应该知道 C18 是长链，如果纯水洗涤，长链蜷缩，不能够洗涤干净，所以要加入有机相。切记。不然损害色谱柱。

    想想相似相容定律。

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:但每次用完后，柱子和系统都是用水将盐冲洗掉了啊

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  • qingqingcao

    第17楼2013/05/29

    有有机溶剂，则使得长链舒展。洗涤干净呢。

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  • qingqingcao

    第18楼2013/05/29

    一般强保留的物质在前面，可以使用反冲方法。但是流速一定要小。对于3.5μm的绝对不能反冲，因为入口处的筛板是5μm的，一冲有可能会把填料冲出来。，所以不能反冲。但是5μm的可以反冲。

    保证干净，就是需要用甲醇乙腈好好冲冲。

    xiaowang268(xiaowang268) 发表:大家能保证柱子再用之前是冲干净的吗

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  • 给力芬

    第19楼2013/05/29

    我们用之前直接上流动相，看下基线怎么样，不过一般要走半个小时左右

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  • xiaowang268

    第20楼2013/05/29

    嗯，快的话也就 十多分钟

    给力芬(huojuncai) 发表:我们用之前直接上流动相，看下基线怎么样，不过一般要走半个小时左右

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