谢谢建议，我的方法一般是15分钟的，要是按照你说的梯度设置，15min 完的成吗？能给我个你们常用的从5% 都高浓度的梯度设置方法吗？我好有个数。谢谢哈。

之所以设这样的梯度，当时可能考虑到不要每个样品都调方法，只要能走到3-12分钟内就OK. 我猜想的啊，是总公司的方法

另外只要是想问问工程师说的因为到氘灯能量太高所以才使得背景高的说法，是正确的吗？

嗯，跑样品调试是没有问题，我就是怕仪器本身是不是有什么故障。因为是新仪器，用了还没有一周，一直是这个样子的。

另外工程师说的，因为氘灯能量太高导致问题突出，不知道他说的对不对。谢谢版主耐心解答，实在是不知道怎么办。

应助达人

有LC-2012A HT这个型号吗，不是LC-2010A HT？
1、0-10min梯度变化也太快，一般梯度中有机相比例变化都不超过2%/min。
2、色谱柱是否被污染了，残留样品没有清洗干净，建议用你现有的梯度在不进样的情况下多运行两次，看看以上的峰有没有变小，如果有变小，被污染的可能性比较大，同时流动相配制的品质也有关系。

想确认仪器有没有故障，你可以用等度洗脱看看。

111012

十几分钟一个梯度？而且每个样品都可以走出来？楼主这个想法不太切合实际，能够如此的话，液相也就不会存在那么多的方法了，另外梯度变化是个缓慢的过程才能在流动相的变化中将极性相近的两个物质分开，一般的梯度程序至少是三十分钟以上，这个时间取决于分离组分的复杂以及梯度自身的结构，你还是用恒流做不同的样品吧

你说的灯能量过高，导致背景吸收高的说法，个人意见没法求证，就算有，也不会主要导致基线偏高的原因

1. 型号却实 LC-2010A HT, 我看错了

2. 色谱柱没有被污染，刚开始用的就有这个问题，换了几个别的色谱柱也是这个问题。流动相水相为屈臣氏蒸馏水，有机相为 J.T.Baker 公司的色谱纯试剂，据反映还是可以的。

等度有走过，没有这些峰的，基本在可接受范围内。

主要是因为我们的样品比较干净，基本就一个主峰，然后很小的几个小峰，是为了能整齐划一哈。我接触到的外包公司里，高通量做样都是这样的，就只编辑几个方法，像5-95, 25-95, 50-95, 70-95, 95-95 。就可以了。我觉得和我们的目的有关系。我们不是做质量标准之类的测试的。

仪器应该没有问题，还是梯度程序不合理，乙腈的比例不要变化过快。

我觉得吧，你这12min的其实不是溶剂峰，只是你设置梯度10.5min回复到初始梯度，而这个梯度变化到达检测器是需要2min（死时间）的，所以这是正常的，没有才不正常。

关于前面的，个人也觉得不太合理，一般从5%-100%需要20分钟比较好。